细胞质膜透性检测实验报告.docVIP

实验九 植物细胞质膜透性的检测 一、实验目的 了解高温对植物细胞膜的伤害作用；学会使用电导率仪 二、实验原理 植物细胞膜是分隔细胞质和胞外成分的屏障，也是细胞和坏境发生物质交换的主要通道以及细胞感受坏境胁迫最敏感的部位。细胞膜的选择透性是最重要的功能之一。逆境伤害会造成膜选择透性的改变和丧失，使细胞内的物质（尤其是电解质）大量外渗，引起组织浸泡液的电导率值发生变化，就可知质膜的伤害程度和所测材料的抗逆性大小。 三、实验器材和试剂 实验仪器和用具 DDS-11A型数显电导率仪、温箱、烧杯、量筒、镊子 实验试剂 蒸馏水 实验材料 小棠菜、橙子 四、实验步骤 用打孔器取出20片小棠菜，20片橙子皮，用蒸馏水漂洗数次，以除伤口上的物质，减少伤口外渗的影响。然后用吸水纸吸干小棠菜和橙子皮的外附水，将每种材料分为两组，每组10片，分别放在盛有20ml蒸馏水的两个小烧杯中，将一杯放在45度温箱中，另一杯放在室温20到30度的条件下。 30分钟后，小心取出实验材料，冷却至室温，用电导仪测量每一杯中溶液的电导率。 重新将刚才取出的材料放入烧杯中，用沸水煮沸10分钟，取出幼苗，冷却至室温后再次测定电导率值。 五、注意事项 1、电导法对水和容器的洁净度要求严格，水的电导值要求1-2s（西门子），所用容器必须清洗后，再用蒸馏水冲净，倒置于洗净且垫有洁净滤纸的瓷盆中，干燥后备用。 2、在电导率测定中要用离子水，若制备困难可用蒸馏水代替，但需要设一空白试管（蒸馏水作空白）。测定样品时同时测定空白电导率值，按以下公式计算相对电导率，即 相对电导率 （浸泡率电导率值—空白电导率值）/ 煮沸后电导率值—空白电导率值 *100 六、实验结果 实验材料 蒸馏水 小棠菜 橙子 室温 357*20u 764*200u 333*200u 室温至100度 357*20u 835*2m 263*2m 45度 357*20u 1159*2m 1273*200u 45度至100度 357*20u 1967*2m 244*2m 1、空白电导率值 219*20u 2、小棠菜在常温下再经沸水处理后的 相对电导率值 （764*20u—219*20u）/ 835*2000u—219*20u *100% 8.76% 小棠菜经45度和沸水处理后的 相对电导率值 （1159*2000u—219*20u）/ 1967*2000u—219*20u *100% 58.85% 3、橙子在常温下再经沸水处理后的 相对电导率值 （333*200u—219*20u）/（263*2000u—219*20u）*100% 11.46% 橙子经45度和沸水处理后的 相对电导率值 （1273*200u—219*20u）/（244*2000u—219*20u）*100% 51.46% 七、结果分析 根据实验结果所得可知，高温胁迫条件下，植物细胞膜的透性会增加，而且温度越高，膜透性就越大，细胞内渗出的物质就越多，组织浸泡液的电导率值就越高。具体表现如下： 煮沸前的组织浸泡液在室温下所测得的电导率比在45℃高温处理后所测得的电导率要小几十到一百倍，说明了高温会造成膜透性的改变或缺失。 在45℃高温处理后所测得的电导率比煮沸后的组织浸泡液所测得的电导率只小几倍，造成原因可能是45℃高温处理后植物细胞膜的透性已缺失了大部分。 在室温或45℃高温处理后再煮沸的组织浸泡液所测得的电导率相差不大，可能是因为煮沸后植物细胞膜的透性已完全丧失，细胞内物质全部外渗。 八、作业 书上的实验设计为什么将电导率的测量和糖的显色反应一并考虑？这种测量方法有何实践意义？ 答：高温胁迫会使原生质膜的半透性消失，使胞内物质大量外渗，而电解质和糖是细胞内容物的主要成分之一。温度越高，渗出的物质越多，外渗液中所含离子和可溶性糖也越多。将电导率的测量和糖一并考虑，可以更肯定高温胁迫下植物细胞膜透性增大，且透性与温度成正比，当温度高到一定程度时，膜透性丧失。外渗液的电导率与可溶性糖浓度也呈一定的正比关系，而温度高到一定程度时，两者之比趋于稳定。