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实验复习专题
实验一
用显微镜观察多种多样的细胞
一、显微镜操作技能及相关知识总结
1. 注意事项
(1)调节粗准焦螺旋使镜筒下降时,两眼要注视物镜与盖玻片之间的距离,到快接近时(距离约为0.5 cm)停止下降。
(2)首先用低倍镜观察,找到要放大观察的物像,移到视野中央,然后换上高倍物镜。
(3)换上高倍物镜后,不能再转动粗准焦螺旋,而只能用细准焦螺旋来调节。
(4)观察颜色深的材料,视野应适当调亮,反之则应适当调暗;若视野中出现一半亮一半暗,则可能是反光镜的调节角度不对;若观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清,则可能是花生切片厚薄不均造成的。
2.目镜与物镜的结构及其长短与放大倍数之间的关系
(1)物镜越长,放大倍数越大,距装片距离越近,如H1;反之则放大倍数越小,距装片距离越远,如H2。
(2)目镜越长,放大倍数越小;反之则放大倍数越大。
3.高倍镜与低倍镜的比较
物像大小
看到细
胞数目
视野亮度
物镜与载玻
片的距离
视野范围
高倍镜
大
少
暗
近
小
低倍镜
小
多
亮
远
大
4.显微镜成像特点
显微镜下所成的像是倒立的虚像,即上下、左右均是颠倒的。细胞在显微镜下的像偏右上方,实际在载玻片上是偏左下方,要将其移至视野中央,应将载玻片向右上方移动,即物像位于哪个方向,则应向哪个方向移动装片,即“同向移动”原则。但研究细胞质环流方向时,显微镜下观察到的方向和实际环流方向一致。
5.显微镜的放大倍数
(1)显微镜的放大倍数是指物体的长度或宽度的放大倍数,而不是面积或体积。
(2)总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。
6.判断污物存在的位置
(1)污物可能存在的位置是:物镜、目镜或装片。
(2)判断方法:分别移动载玻片、物镜和转动目镜,观察污物是否移动,来判断污物所处的位置。
应用指南:视野中细胞数目的相关计算。若视野中细胞成单行,则计算时只考虑长度或宽度,可根据放大倍数与视野范围成反比的规律计算。若视野中充满细胞,计算时应考虑面积的变化,可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。
二、显微观察类实验总结
用显微镜观察的方式分为两种:
1.原色观察:即观察材料不用染色,直接用显微镜观察即可。相关实验有:使用高倍显微镜观察几种细胞、用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的吸水和失水等。
2.染色观察:即观察材料要经染色剂染色后才可用显微镜观察。相关实验有:观察DNA和RNA在细胞中的分布、用高倍显微镜观察线粒体、观察细胞的有丝分裂或减数分裂等。
实验二
检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。
3.蛋白质+双缩脲试剂―→紫色
二、实验流程图示
先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此本实验属验证性实验。
1.还原糖的检测和观察
结论:还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有还原糖。
注:溶液颜色的变化过程为浅蓝色―→棕色―→砖红色
2.脂肪的检测和观察
方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色
方法二:
3.蛋白质的检测和观察
选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液
结论:说明组织样液中存在蛋白质
4.淀粉的检测和观察
实验注意问题
1.实验材料的选择
(1)还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等,但不能选用甜菜、甘蔗,因为它们所含的蔗糖是一种非还原糖;马铃薯因含淀粉较多也不能做实验材料;不能选西瓜、血液(含葡萄糖)、含还原糖的绿色叶片等做实验材料,以避免颜色的干扰。
(2)脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的花生种子。
(3)蛋白质的鉴定实验中,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。
2.做鉴定蛋白质的实验时,在鉴定之前,可以留出一部分样液,以便与鉴定时样液的颜色变化作对照,这样可以增强说服力。
3.蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后黏固在试管内壁上,使反应不彻底,也不易刷洗试管。
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
不
同
点
使用方法
甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用
使用时先加A液再加B液
呈色反
应条件
需水浴加热
不需加热即可反应
反应原理
还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O
具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物
颜色
砖红色
紫色
浓度
乙液CuSO4溶液浓度为0.05 g/mL
B液CuSO4溶液浓度为0.01 g/mL
相同点
都含有NaOH溶液、CuSO4溶液两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL
【辨析比较】斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析
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