实验亲和层析纯化IgG技巧.pptVIP

生物分离与纯化实验 共34学时 持续改进 协作 实验报告： 1.信息栏填全，遗漏项：同组人员； 2.结果计算：过程完整 3.讨论分析不可缺项，内容丰满，见解细致。 上次实验总结 实验（三）血清中抗体纯化（16学时） 配基 特异性 Protein A 许多IgGs 的Fc 片断 Protein G 许多IgGs 的Fc 片断 Antigen 特异的抗体 Anti-IgG 特异免疫球蛋白 抗体纯化配基类型 族特异性 专一特异性 二、实验原理 低 pH下洗脱 用 rProtein A Sepharose? 分离IgG Column: HiTrap? Protein A FF 结合缓冲液: 20 mM 磷酸钠, pH 7.0 洗脱缓冲液: 0.1 M 甘氨酸- HCl, pH 3 注意: 为了保护抗体的活性，将洗脱组分收集于 1 M Tris-HCl, pH 7.5中 二、实验原理 二、实验原理蛋白 A 和 蛋白 G 的结合特异性 种属 蛋白 A 蛋白 G 结合 结合 人 IgA 可变的 - IgD - - IgE IgG1 ++++ ++++ IgG2 ++++ ++++ IgG3 - ++++ IgG4 ++++ ++++ IgM* 可变的 - 鸟类蛋黄 Ig