ZX第5章_基因的调控.ppt

正调控和负调控 在负调控系统中，如果不被阻抑蛋白关闭，基因就能够表达。 任何干扰基因表达的作用都是负调控。其共同特点是一个阻抑蛋白或与DNA结合，阻止RNA聚合酶启动转录，或与mRNA结合阻止核糖体启动翻译。 受正调控的基因，仅当活性调控蛋白存在时，才能表达。正调控中控制特定操纵子的机制正好与负调控相对应。正调控与负调控不同，它不妨碍起始，而调控蛋白对正调控来说，则必不可少。 调节蛋白与DNA及RNA聚合酶相互作用，协助转录起始。正调节蛋白应答的小分子通常称为激活物(activator)。 操纵子分为诱导型和阻抑型两类: 只有在小分子诱导物存在时，诱导型操纵子才能发挥作用. 只有在小分子辅阻抑物不存在时，阻抑型操纵子才能发挥作用. 另一个变通性剪接的例子是肌钙蛋白T基因。含有18个exon，其中第4～8共5个exon可以随机组合而产生32种组合；再加上16、17两个外显子是互斥性表达。因而,可能表达64种mRNA（图5.31）。 变通性断裂基因通过不同的剪接方式产生多种肽链，打破了“一个基因，一个蛋白”，“一个顺反子，一条肽链”的概念。 变通性剪接实际上是外显子/内含子水平上对基因表达的调控。 基因内有基因，基因本身变化基因，使基因的定义变得似是而非。分子遗传学把基因放在分子水平上研究的结果，不得不面对这样一个问题：基因是什么？ 肌钙蛋白T基因mRNA剪接 5.8.2 反义RNA 反义RNA（antisense RNA）：是一种与mRNA互补的RNA分子，它是反义基因或基因的反义链转录的产物。 反义RNA与mRNA形成的RNA-RNA双体结构，阻止了mRNA的有效翻译，从而调控基因表达。反义RNA不必具有和mRNA等长的核苷酸链，短的片段（50个核苷酸）就可能起到抑制翻译，调控基因表达的作用。 5.8.2.1 IS10的多拷贝抑制 IS10是抑制比较简单的转位/座子（tran-sposon），又叫插入序列。它的表达属于一种多拷贝抑制现象。即每个拷贝的转位速率随着细胞中IS10拷贝数增加而减少。这种调控机制是由于反义RNA参与转录后抑制的结果。 　　IS10仅仅转录一种蛋白质---－－转位酶（transposae）,但它同时在反义链上编码一种反义RNA，该反义RNA的启动子位于转位酶基因5 ′区的反义链之内，其反义序列沿相反方向延伸，直至越过转位酶基因的5＇末端，从而到达调控基因表达的目的。 当IS10的拷贝数愈来愈多时，反义RNA的浓度也愈来愈高，其反义抑制效应也愈来愈高，而每一拷贝的转位酶的表达则随之降低。这就是所谓的多拷贝抑制。 这是因为在转录酶mRNA与反义RNA的浓度都很稀的情况下，二者不易形成RNA-RNA二聚体。 5.8.2.2 ColE1质粒复制的反义RNA ColE1是细菌中的一种小的、多拷贝质粒，同类的质粒还有pMB1、REF1030、NTP1等。 此类质粒的复制是借助一个自ColE1复制起点延伸约500nt的转录物----RNAⅡ作为先导链的引物来进行的。而反义RNA是在该引物表达区域内的反义链所表达的一小段RNA---RNAⅠ，约100nt。它在ColE1复制过量时，可与RNAⅡ的5′末端区互补结合，使其构型改变而丧失引物功能，使菌体中的ColE1质粒不能继续复制，而保持数目稳定。 RNAI的反义效应能调控ColE1质粒在细胞里的数目。 ColE1质粒一般维持20个左右，而在ColE1因突变部分缺乏反义RNAI时， ColE1转录数目可达250. ｛｝ 5.9 真核基因的调控模型—Davidson-Britten 1973年提出模型，要点： 诱导因子（激素、细胞内/细胞间同类分子）与特异的蛋白形成复合物，联结到序列特异的感应位点（S）上，感应位点使与其连锁的整合基因（I）活化。整合基因产生的激活蛋白（A），与特异的序列---接受位点（R）结合，从而导致与其连锁的结构基因活化，转录特定种类的mRNA。 图5.33 诱导因子→蛋白形成复合物→ →感应位点（S）→整合基因（I）活化→激活蛋白（A ）→接受位点（R）结合。 1979年，Davidson-Britten对模型又做了较大的修改，其特点： 1）该模型已由十年前的基因调控（DNA水平）退居为转录水平的调控模型，是一个转录和转录后所发生的加工过程为基础的调控系统。 2)提出核内RNA包括两个部分： 一部分是结构基因转录物，称为结构性转录本（CT）； CT相当于pre-mRNA,即mRNA前体，它含有一个结构基因编码区，少量插入序列，前导序列和短而分散的控制序列。 另一部分是整合