肺结核痰涂片检查工作规范.docVIP

肺结核痰涂片检查工作规范 痰涂片检查是肺结核病人诊断与鉴别诊断、制定化疗方案、疗效考核的主要方法或手段。为贯彻落实市卫生局《关于在全市一级以上医疗单位中开展传染性肺结核筛查工作的通知》的精神，加强传染性肺结核病人发现力度，特制定本规范。 一、痰检的对象和要求 （一）对象 1．咳嗽、咳痰≥3周或有咯血或血痰症状以及胸片异常者。 2．进行疗效考核的病人：凡已确诊、登记、治疗的肺结核病人，在化疗期间应按规定定期作痰菌复查。 1）初治涂阳病人（含重症涂阴病人）在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳病人在疗程满2、5、8个月时，各查痰一次。 2）初、复治涂阳病人在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满 3个月时增加查痰一次。 3）确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后满2和6个月时进行痰菌检查。 （二）要求 1．初诊病人应送3份痰标本（夜间痰、清晨痰和即时痰）。如无夜间痰，在留清晨痰后2～3小时再留取一份痰标本；或在送痰时，留取两份即时痰。治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰（清晨痰和夜间痰）。 2．痰标本采集：即时痰为病人就诊时咳出的痰液。清晨痰为清晨深咳出的痰液。夜间痰为就诊前一天晚睡前咳出的痰液。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为3～5毫升。 应由检验人员或专人验收痰标本，痰液不合格者，要求重新送检。难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状以供分析结果时参考。 痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4厘米、高2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号 （门诊序号或病人登记号）及日期。 3．痰标本的保存和输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。不能立即作涂片检查的痰标本，须置4℃冰箱保存，防止痰液干涸或污染。 需送上一级细菌实验室培养的痰标本，外送前应认真核对痰标本容器上标 注，是否正确和清晰，是否与化验单一致。痰容器应采用专用的结核杆菌和痰标本冰盒运送，或以纸张和塑料袋封装、扎牢顺序放置于包装袋内。盒外注明勿倒置标志。 4．送检时，县（市、区）结防所（科）医师应填写检验单。填写项目包括：病人姓名、地址、登记号（或门诊序号）、送检日期（或初诊日期）、送检原因（初诊病人或随访病人）。检验单应与痰标本分别放置在不同容器中，一齐送交上级实验室。 5．收到痰标本后，实验室检验人员仔细核对标本和检验单各项内容，查看痰标本是否合格。随后按顺序编号，及时检查和登记。 6．废弃标本和污染物的处理： 1）痰盒和废弃标本等污染物，均须经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗，严禁不经灭菌随意处理。 2）痰盒等污染物如采用焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。焚化不彻底，或暴露焚烧是有害的。 3）痰检工作台面的消毒：可将痰标本置于一搪瓷盘中，在操作厨中进行痰涂片操作。涂片操作完成后，将盘与废弃物等一并进行高压蒸汽灭菌，或与操作台面同时以3％石碳酸或其它可靠的消毒液擦拭后，再以紫外线灭菌灯 （距离1米）照射30分钟。 二、痰直接涂片检查法 （一）涂片 取经95％乙醇擦拭脱脂过的干燥、清洁、无油污、无划痕的新玻璃片，于玻片背面的左端1／3处以蓝色或黑色记号笔（玻璃铅笔）编号。 用接种环或折断的竹签茬端，挑取痰标本的脓样、干酪样部分约0．05～ 0．1ml，于玻片正面的右侧三分之二处均匀涂抹成2×2．5厘米卵圆形痰膜。自然干燥后待检。 一张玻片只可涂抹一份标本。玻片只应使用一次，不得清洗后再次使用。 （二）萋尔—尼尔逊氏染色法（Ziehl—Neelsen） 简称萋尼氏染色法： 1．试剂： 1）碱性复红乙醇染色储存液： 碱性复红液：8克碱性复红溶于95％乙醇100毫升中。 5％石碳酸水溶液：5克石碳酸溶于100毫升蒸馏水中。 2）碱性复红乙醇染色液： 10毫升碱性复红储存液与90毫升5％石碳酸水溶液混合。 3）5％盐酸乙醇脱色液： 5毫升浓盐酸与95毫升95％乙醇混合。 4）0。3％亚甲兰复染储存液： 0．3克亚甲兰溶于50毫升95％乙醇中，完全溶解后加蒸馏水至终体积100毫升。 5）亚甲兰复染液： 以蒸馏水10倍稀释0．3％亚甲兰复染储存液即得亚甲兰复染液。 2．染色步骤： 1）火焰固定涂片。 2）滴加碱性复红乙醇染色液，盖满痰膜。小心火焰加热至出现蒸汽后，脱离火焰，保持染色三分钟。染色期间应始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可续加染色液。切勿使染色液沸腾。 3）流水自玻片背面上端轻洗，洗清染色液。 4）自痰膜上端外缘滴加脱色液，流过痰膜。需脱至痰膜无可视红色为止。脱色应单片进行。 5）流水自玻片背面上端轻洗，去脱色液。 6）滴加亚甲兰复染液，染色30秒钟。 7）流水自玻片背面上端轻洗，去复染液。 8）待干后镜检。 3．镜检与报告： 光学显微