四倍体连翘组培快繁技术的研究.pdfVIP

摘要 本试验以四倍体连翘(tetraploid Forsythia)当年生幼嫩枝条、叶片为试验材料， 建立了四倍体连翘的组织培养体系。分别对外植体的消毒处理、初代培养、继代培养、 生根培养和驯化移栽几方面进行试验，对影响四倍体连翘组织培养的因素进行了比较 系统地研究，从有利于工厂化育苗的目的出发，试图为四倍体连翘生物技术育种提供 技术和方法，同时为其进一步遗传操作研究和扩大药材资源奠定基础。主要研究内容 及结果如下： (1)外植体消毒 以四倍体连翘茎尖、茎段和幼嫩叶片为外植体，进行消毒处理试验。选择75％ 酒精以及2％次氯酸钠配合使用进行灭菌处理。试验结果表明：2％次氯酸钠的处理时 间长短对四倍体连翘外植体的消毒效果起到关键作用，需要严格控制。四倍体连翘茎 尖、茎段外植体的最佳处理方式是75％酒精处理30 S，2％次氯酸钠处理7 min。四倍 体连翘叶片外植体的最佳处理方式是75％酒精处理30 S，2％次氯酸钠处理3 min。 (2)植物离体培养 以四倍体连翘茎尖以及带腋芽的茎段为外植体，探讨不同植物激素6-BA、NAA 的不同浓度配比对组培苗离体培养的影响。试验结果表明：四倍体连翘的组织培养宜 选择茎段为外植体。适宜四倍体连翘腋芽诱导的培养基为MS+6-BA 2．0 megL+NAA 0．2 mg／Lo适宜四倍体连翘茎尖、茎段增殖培养的培养基为MS+6-BA 9．0 mg／L+NAA 0．05 mg／L。 (3)愈伤组织培养 以四倍体连翘幼嫩叶片为外植体，探讨不同植物激素6-BA、2,4．D、NAA的 不同浓度配比对叶片愈伤组织诱导以及增殖培养的影响。试验结果表明：有利于四倍 体连翘叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+6一BA 1．0 mg／L+2,4．D 1．0 mg／L。经观察发 现，在添加各种不同激素及不同配比的培养基上，叶片愈伤组织生长缓慢，颜色为黄 绿色或深绿色，均未产生类似不定芽的小突起，继续培养一段时间后愈伤组织基本褐 化死亡。 (4)组培苗生根培养 以通过增殖培养诱导出的丛生芽单芽为培养材料，进行生根培养，探讨不同植物 激素IBA、lAA的不同浓度配比对组培苗生根培养的影响。试验结果表明：在试验范 围内，适宜诱导四倍体连翘生根的培养基为I／2MS+IBA 0．4 mg／L+IAA 0．4 mg／L， 此时组培苗生根状况较好。 (5)组培苗的驯化移栽 将已经生根的组培苗进行驯化移栽，研究不同炼苗时间以及不同基质对四倍体连 翘组培苗移栽成活率的影响。试验结果表明：炼苗处理与不炼苗处理对组培苗的移栽 成活率方面存在显著性差异，经过炼苗处理的组培苗的移栽成活率显著高于不经过炼 苗处理的小苗。四倍体连翘组培组培苗最佳炼苗处理方式为半开封口膜自然光3 d-I- 开瓶口室内4 d。四倍体连翘组培苗最佳移栽基质为营养土：蛭石=3：1，此时，小苗 万方数据 叶色浓绿，生长健壮。 关键词：四倍体连翘；快速繁殖；愈伤组织；生根培养；驯化移栽 万方数据 Rapid propagation technique for tetraploid forsythia by tissue culture Author：Xiaoya-Yuan Major：Silviculture Tutor：Shifu—Ren (College of Forestry，Agricultural University of Hebei，Baoding，China 07 100 1) Abstract In the present study，using the health and young shoots，leaves of tetraploid forsythia as experimental material，established a tissue culture system of tetraploid forsythia．The test should include：disinfected explants，the primary culture，subculture，rooting and acclimatization，systematically studied the factors that affecting the tissue culture of tetraploid forsythia．The purpose of the test is conducive to industrialize breeding，and attempt to provide techniques and methods of biotechnology breeding tetraploid forsythia， further genetic man