2016届全国卷比福建卷增加的四个实验.docVIP

DNA的粗提取与鉴定 一、实验原理 DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的不同而不同。当NaCl的浓度为0．14mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的其他许多物质溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取含杂质较少的DNA。 DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色；DNA还有遇甲基绿溶液被染成蓝绿色的特性。上述两种方法均可用于鉴定DNA的存在。方法步骤 制备鸡血细胞液 取0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，与新鲜的鸡血混合并搅拌，然后静置一天或离心机离心约2～3min防止血液凝固，使血细胞与血浆分离 提取细胞核物质 取20mL蒸馏水与约5～10mL的鸡血细胞液混合并充分搅拌，然后用单层纱布过滤，取滤液于烧杯中 使细胞过度吸水而破裂 溶解DNA 取2mol/L的NaCl溶液40mL与上述滤液混合后， DNA在高浓度氯化钠溶液中溶解度最大 析出DNA并滤取 沿烧杯内壁慢慢加入蒸馏水并轻轻搅拌，至白色丝状粘稠物不再增加时停止加水，然后用多层纱布过滤，取纱布上的粘稠物 DNA的溶解度随氯化钠溶液浓度的降低而降低 DNA的再溶解 用镊子夹取纱布上的粘稠物放入20mL浓度为2mol/L氯化钠溶液中，搅拌至完全溶解，然后用两层纱布过滤，取其滤液放入小烧杯中 DNA在高浓度氯化钠溶液中溶解度最大 提取较纯净的DNA 取95%的、冷却的酒精50mL与滤液混合搅拌，待出现丝状物时用玻璃棒将其卷起 DNA不溶于酒精，出现沉淀 取两支20 mL的试管，各加入物质的量浓度为0．015mol／L的NaCl溶液5mL，将丝状物溶解。然后放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，等试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。 DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色 ? 1.从鸡血细胞核中提取的物质是DNA吗？ 在鸡血细胞中加入蒸馏水，并且搅拌，利用渗透作用原理使鸡血细胞破裂，搅拌进一步促进了鸡血细胞的破裂，于是释放出其中的DNA，当然也有少量的RNA，还的蛋白质。因此，释放出的物质是DNA、RNA和蛋白质的混合物，不仅仅只有DNA。 2.可以用动物的组织细胞或植物作为实验材料吗？ 可以，但都需要研磨，以植物作为材料通常在研磨时还加入一定量的食盐和洗涤剂，洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失缓缓旋转玻璃棒的方法卷起利用DNA在浓度较低的氯化钠溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液中加入大量(300 mL )蒸馏水,稀释氯化钠溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关破译生物基因组DNA的遗传信息或进行基因操作，首先要提取细胞核DNA。下列不适宜作为DNA提取的实验材料是 （ ）A、鸡血细胞 B、蛙的红细胞 C、人的成熟红细胞 D、菜花．下列实验中所用试剂错误的是 （）A、在观察植物细胞有丝分裂实验中，使用醋酸洋红溶液使染色体着色B、在提取叶绿体色素实验中，使用丙酮提取色素C、在DNA的粗提取与鉴定实验中，使用氯化钠溶液析出DNAD、在蛋白质的鉴定实验中，使用苏丹染液鉴定蛋白质DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述。正确的是（　　） 试剂 操作 作用 A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 防止血液凝固 B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状 C 蒸馏水 加入到溶解有DNA的NaCl中 加速DNA的溶解 D 冷却的酒精 加入到过滤后DNA的NaCl中 产生特定的颜色反应 5．在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA，可以依据的原理是 A．在物质的量浓度为0.14 mol／L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小 B．DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色 C．DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精 D．质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用 6．①蛋白质在10%NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；③DNA溶于10%NaCl溶液但在95%酒精中呈白色絮状沉淀，析出。 实验材料：白萝卜。 实验用具：粉碎机、烧