免疫胶体金银技术资料.ppt

免疫金技术发展简史 1971年 胶体金应用于免疫组化 1978年免疫金技术检测B淋巴细胞表面抗原 1981年免疫金银法 1986年彩色免疫金银法 3 蛋白质的胶体金标记 原理： PH值等于或稍偏碱性的蛋白质等电点时，蛋白质呈中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质表面张力最大，处于微弱的水化状态，能牢固吸附于金颗粒表面，形成蛋白层，阻止胶体金颗粒相互接触，而使胶体金处于稳定状态； PH值高于蛋白质等电点时，蛋白质带负电荷，与胶体金颗粒负电荷相互排斥不能结合。 稳定剂：牛血清白蛋白、卵白蛋白、聚乙二醇、明胶 （1）待标记蛋白质准备 透析除盐 除去蛋白质内多余电解质，过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的电位，影 响蛋白质吸附。 方法:蛋白质置于透析袋直接放入双蒸水或极低浓度盐水透析 去除蛋白沉淀 低温保存的蛋白质或抗体易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针 的稳定性有影响，标记前离心除去聚合物。 待标记蛋白质最适稳定量的测定 光电比色法、目测法 5nm SPA胶体金电镜观察 * * 第六章 免疫金银及铁标记技术 免疫胶体金银技术 一、免疫金技术 二、免疫金银法 三、彩色免疫金银法 四、免疫金和免疫金银法的优点 五、免疫金银法染色中常见的问题及对策 六、免疫胶体铁技术 一、免疫金技术 胶体金：金的水溶液，具有一般溶胶特性