医学微生物基本检验技术(二).ppt

实验一 细菌检验基本技术(二) 目的 掌握平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。 熟悉接种细菌工具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领。 【器材】 【标本】 琼脂平板:腐生葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、 铜绿假单胞菌 斜面：大肠埃希菌 牛肉膏汤：铜绿假单胞菌，表皮葡萄球菌 半固体：大肠埃希菌、表皮葡萄球菌 【操作】 1.分区划线分离法（用于细菌标本的分离纯化。） 菌落的描述 细菌的菌落特征: 菌落大小（1mm,小；1m3mm，中等；3mm，大） 形状（露滴状、圆形、菜花样、不规则等） 高度（突起、扁平或凹陷） 边缘（整齐、波形、锯齿状、卷发状等） 表面（光滑、粗糙等） 湿润度（干燥、湿润等） 透明度（不透明、半透明、透明等） 颜色（红色、灰白色、黑色、绿色、黄色或无色等） 溶血性（α溶血、β溶血或γ溶血） 特殊气味 （2）琼脂斜面接种法 主要用于单个菌落的纯培养及保存菌种，也可用于某些生化鉴定试验的接种。 （3）穿刺接种法 用于半固体培养基或KIA、明胶等具有高层的培养基接种。半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。 动力阳性 动力阴性 （4） 液体接种法 用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。 【注意事项】 接种细菌时不要说话，严格无菌操作；接种前要灼烧接种环，?灼烧后接种环要冷却；划线时用腕力，不要使接种环嵌入琼脂；分区划线接种时各个分区要分明；接种完后在培养基底部贴上标签。? * * 接种工具 接种环与接种针 五段分区法 孵育后情况 单菌落（clone) 菌苔(lawn) 光滑型菌落 粗糙型菌落 斜面培养基 斜面培养基接种后菌落生长示意图 菌苔(lawn) 沉淀生长 混浊生长 表面生长 *