绝对定量和相对定量案例.pptVIP

实时荧光定量PCR技术的原理及应用 (Real time Quantitative PCR) 分子生物学技术平台 江燕琼 提纲：?? 实时荧光定量PCR原理?? 数学原理 化学原理 实时荧光定量PCR的方法应用 绝对定量 相对定量 定量PCR的实验要素 平台定量PCR仪器介绍 实时荧光定量PCR定义： 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实现了实时监测整个PCR进程，对起始模板进行定量分析的方法。 与普通PCR的区别 普通PCR技术： 在PCR结束后对终点产物进行定量分析。 实时定量PCR技术： 实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起 始模板进行定量。 荧光阈值是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，一般荧光域值的设置是 基线（背景）荧光信号的标准偏差的 10 倍。 每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数被称为 CT 值（ threshold value ）。 定量PCR的数学原理 斜率与扩增效率 荧光定量PCR化学原理 非特异