分光光度法课稿.ppt

* 参 比 溶 液 溶剂 试剂 试液 显色剂 参比液 一般无色 无色 无色 无色 溶剂空白 无色或 有色 有色 试剂空白 （不加试液） 有色 试液空白 有色 有色 褪色空白 * 3. 调整吸光度读数范围: 控制A=0.2 ~ 0.8 (对应T为65 ~ 15% ) 可以从下列几方面想办法： （1）调整浓度 计算而且控制试样的称出量，含量高时，少取样，或稀释试液；含量低时，可多取样，或萃取富集。 （2）选择不同厚度的比色皿, 调节吸光度大小。 * 15.4 吸光光度法的应用 15.4.1 单一组分的测定 1. 金属离子: Fe-phen, Ni-丁二酮肟, Co-钴试剂 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL) A 。 。 。 。 * 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 Ax cx A＝? b c 标准曲线法 (校准曲线) 未知溶液浓度的测定 * 15.4.2 多组分的同时测定 1.若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 2.若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加和性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= εaλ1bca ＋εbλ1bcb Aλ2= εaλ2bca ＋εbλ2bcb * A A λ λ λ1 λ1 λ2 λ2 双组分的吸收曲线 * 15.4.3 络合物组成的测定 1. 摩尔比法: 固定cM ,改变cR 1:1 3:1 c(R)/c(M) A 1.0 2.0 3.0 通常是固定金属离子M的浓度，逐渐增加络合剂的浓度。在一定波长下，测定其吸光度，绘制曲线，用作图法求得络合比。 * 习 题 P394 1, 2, 6 * 第15章 可见分光光度法思考题 1．朗伯-比耳定律的物理意义是什么？写出其数学表达式。 2．摩尔吸光系数ε的物理意义是什么？其大小与哪些因素有关？ε在分析化学中有何意义？ 3．什么是吸收曲线？什么是标准曲线？它们有何实际意义？ 4．显色反应如何选择？ 5．吸光度测量条件如何选择？ 6．光度分析法中，参比溶液应如何选择？ * 1.答：当一束平行的单色光通过液层厚度为b的有色溶液时，溶液的吸光度A与液层的厚度b和溶液的浓度c成正比。即A= lg(I0 / I) = εbc * 2.答：摩尔吸光系数ε在数值上等于1mol·L-1吸光物质在1cm光程中的吸光度。它是吸光物质在特定波长下的一个特征常数。其单位为L· mol-1 ·cm-1。由于ε值与入射光波长有关，故表示ε时，应注明所用入射光波长。 在分析化学中，ε值的大小反应了：（1）吸光物质对某一特定波长光吸光能力大小的量度。ε值越大，该吸光物质的吸光能力越强。（2）衡量光度分析方法灵敏度的重要指标，ε值越大，方法的灵敏度越高。 * 3.答：以入射光波长作横坐标，用分光光度计测量每一波长下物质对光的吸光度作纵坐标所绘制的曲线，称为吸收曲线。其作用是：选择入射光波长，在此波长下测量吸光度，则分析的灵敏度最高。因此，吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的重要依据。 在某特定波长下，用分光光度计测量一系列不同浓度的标准溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标所绘制的曲线，称为标准曲线（亦称工作曲线）。它是作为待测物质定量分析的依据。如果在相同条件下测得待测试液的吸光度值，从标准曲线上就可查得待测试液的浓度，这就是标准曲线法。 * 4.答：显色反应的选择原则是： （1）选择生成的有色物质（MR）的ε较大的显色反应； （2）显色剂（R）在测定波长处无吸收； （3）反应生成的有色物质（MR）的组成要恒定，化学性质稳定。 * 5.答：吸光度测量条件包括三个主要方面： （1）入射光波长的选择： 入射光的波长应根据吸收曲线选择λmax为宜。因在此波长处ε值最大，使测定具有较高的灵敏度。 （2）参比溶液的选择： 在吸光度的测量中，由于比色皿的反射以及溶剂、试剂等对光的吸收，使得测得的吸光度值不能真实地反映待测物质对光的吸收 ，也就不能真实地反映待测物质的浓度。为了校正上述影响需要正确选择参比溶液。通过调节仪器使参比溶液的吸光度为零（A= 0）,或透光度T= 100% 。借此消除上述影响。 * （3）吸光度读数范围的选择 吸光度值太大或太小时，读数波动所引起的吸光度读数误差较大，为了减小读数误差，应使测量的吸光度值控制在A= 0.2～0.8（或透光度T在15%～65%）范围之内。 可以采用以下措施： （a）控制溶液的浓度，如改变试样的称量，