动物技术-幻灯片.ppt

Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse Research Techniques for the Mouse 豚鼠的抓取与固定 兔、鼠脱毛剂配方 1、硫化钠3g，肥皂粉1g,淀粉7g,加适量水调成糊状。 2、硫化钠8g，淀粉7g，糖4g，甘油5g，硼砂1g,加水75ml。 3、硫化钠8g，溶于100ml水中。 大动物骨髓的采集 活体采集，给动物麻醉、固定、局部除毛，消毒皮肤，把骨髓穿刺针固定好，左手把穿刺点皮肤绷紧，右手把针刺入，有落空感即刺入。 实验动物的处死 1、保证操作人员的安全。 2、不能影响实验结果。 3、尽可能缩短动物的致死时间。 4、确定动物是否已死不能只看呼吸。 5、尽量避免动物的恐惧、疼痛和痛苦。 6、禁止无关人员参加。 实验动物的处死 颈椎脱臼法 空气栓塞法 急性大失血法 巴比妥类快速注射法 二氧化碳吸入法 断头法 论文中有关动物实验的描述 实验动物品种、品系名称 来源、遗传学背景及微生物学质量 性别、规格 动物实验条件 动物实验的某些处理方式 实验动物科技新进展 吉林大学医学 实验动物中心 卢 维 实验动物科技新进展 实验动物设施和动物实验替代 免疫缺陷动物 转基因动物和转基因动物技术 实验动物设施和动物实验替代 实验动物设施 动物实验替代 动物保护和实验动物福利 免疫缺陷动物 是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成份缺陷的动物。目前，世界各国相继培育成一系列免疫缺陷动物，从啮齿类扩展到马、牛等大型哺乳类动物。例如先天性免疫缺陷的动物有T淋巴细胞缺陷的裸大鼠、裸小鼠、B淋巴细胞功能缺陷动物、NK细胞功能缺陷的Beige（bg）小鼠、联合免疫缺陷动物及其他免疫缺陷动物；还有获得性免疫缺陷及其相关的AIDS（获得性免疫缺陷综合征）动物模型等。现在我国常用的是裸鼠。 裸小鼠 1962年英国格拉斯哥医院Grist在非近交系的小鼠偶然发现有个别无毛小鼠，后来证实是由于基因突变造成的，并伴有先天性胸腺发育不良，称为裸小鼠（nude mice），用“nu”表示裸基因符号。1966年Flanagan证实了这种无毛小鼠是由于第11对染色体上等位基因突变引起的。1968年Pantelouris发现裸小鼠已失去正常胸腺。这些发现引起医学生物学工作者的极大兴趣。裸小鼠的培育成功为研究胸腺功能、免疫学机制提供了理想的动物模型。 裸小鼠 裸小鼠的主要特征表现为无毛（hair less）裸体（nude）和无胸腺（athymus）。随着鼠龄增加皮肤变薄、头颈部皮皱褶、发育迟缓。由于无胸腺，仅有胸腺残迹或异常上皮，这种上皮不能使T细胞正常分化，缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能，因而细胞免疫力低下。裸小鼠B淋巴细胞正常，但功能欠正常，免疫球蛋白主要是IgM，只含少量IgG。裸鼠由于T淋巴细胞缺陷，不能执行正常T细胞功能，在混合淋巴细胞反应中全无有丝分裂反应，也不产生细胞毒效应细胞，对刀豆素A或植物凝集素P亦无裂原应答，无接触敏感性，无移植排斥，成年裸小鼠（6—8周龄）较普通鼠有较高水平的NK细胞活性，但幼鼠（3—4周龄）的NK细胞活性低下。裸小鼠粒细胞比普通小鼠数量少 裸小鼠 裸小鼠易患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、饮水等都得经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。由于纯合型雌裸小鼠nu/nu受孕率低，乳腺发育不良且有食仔习惯，因此生产上一般采用纯合型雄鼠与杂合型雌鼠交配（♂nu/nu×♀nu/+）可获取1/2纯合型仔代。裸小鼠国内常用品系为BALB/C－nu./nu、Swiss－nu/nu和NC－nu/nu等。目前利用育种技术将裸基因（nu）导入21个近交系小鼠，不同品系的裸鼠具有不同的生物学特征。但应注意，随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响（如病毒感染），裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4—8周小鼠。 裸大鼠 裸大鼠是由英国Rowtt研究所在1953年发现的，基因符号为rnu。因在普通环境下饲养，仅维持15—16代。1975年再次发现纯合子裸大鼠（rnu/rnu），证实属常染色体隐性遗传。1977年英国MRC实验动物中心建立了