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第九章 B淋巴细胞 第一节 B细胞的分化发育 哺乳动物的B细胞是在中枢免疫器官——骨髓中发育成熟的。骨髓中髓质基质细胞表达的细胞因子和黏附分子是诱导B细胞发育的必要条件。B细胞在中枢免疫器官中的分化发育过程中发生的主要事件是功能性B细胞（抗原）受体（B cell receptor, BCR）的表达和自身免疫耐受的形成。 （一）BCR的基因结构及其重排 BCR是表达于B细胞表面的免疫球蛋白，即膜型免疫球蛋白(membrane immunoglobulin, mIg)。B细胞通过BCR识别抗原，接受抗原刺激，启动体液免疫应答。编码BCR的基因在胚系阶段以分隔的、数量众多的基因片段（gene segment）的形式存在。在B细胞的分化发育过程中，这些基因片段发生重排（rearrangement）和组合，从而产生数量巨大、能识别特异性抗原的BCR。 1．BCR的胚系基因结构 人重链基因由编码可变区的V基因片段（variable gene segment）、D基因片段（diversity gene segment）和J基因片段（joining gene segment）以及编码恒定区的C基因片段组成。人轻链基因分为κ基因和λ基因，轻链V区基因只有V、J基因片段。轻重链每种基因片段以多拷贝的形式存在。 2．BCR的基因重排及其机制 Ig的胚系基因是以被分隔开的基因片段的形式成簇存在的，只有通过基因重排形成V D J（重链）或V J（轻链）连接后，再与C基因片段连接，才能编码完整的Ig多肽链，进一步加工、组装成有功能的BCR。Ig V区基因的重排主要是通过重组酶（recombinase）的作用来实现的重组酶可以从众多的V（D）J基因片段中将1个V片段， 1个D片段（轻链无D片段）和1个J片段重排在一起，形成V（D）J连接（图9-2），最终表达为有功能的BCR。Ig胚系基因重排的发生具有明显的程序化，首先是重链发生基因重排，随后是轻链重排。经过Ig胚系基因的重排，B细胞的DNA序列与其他体细胞有很大不同，这是存在于B细胞和T细胞中非常独特的生物学现象。 3．等位基因排斥（allelic exclusion）和同种型排斥（isotype exclusion） 一个B细胞克隆只表达一种BCR，只分泌一种抗体。对于遗传上是杂合子的个体来说，保证B细胞克隆单一的特异性以及只表达一种Ig型的轻链，主要是通过等位基因排斥和同种型排斥的机制来实现的。等位基因排斥是指B细胞中位于一对染色体上的轻链或重链基因，其中只有一条染色体上的基因得到表达，先重排成功的基因抑制了同源染色体上另一等位基因的重排。同种型排斥是指(轻链和(轻链之间的排斥，(轻链基因的表达成功即抑制(轻链基因的表达。 （二）抗原识别受体多样性产生的机制 1．组合造成的多样性 抗原识别受体的胚系基因以众多的V、D、J片段成簇存在，当发生V、（D）、J基因片段重排时，只能分别取用众多V、（D）、J基因片段中的1个，因而可产生众多V区基因片段组合。 2．连接造成的多样性 Ig各基因片段之间的连接往往并不准确，有插入、替换或缺失核苷酸的情况发生，从而产生新的序列，称为连接多样性。在Ig V区基因重排过程中，V、（D）、J基因片段的连接处可以丢失或加入数个核苷酸。如末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）能将N-核苷酸加到V、D、J基因片段重排中出现的DNA断端，从而显著增加了BCR和Ig的多样性。 3．体细胞高频突变造成的多样性 体细胞高频突变造成的多样性是在已成熟B细胞即已完成V基因重排的基础上发生的，而且发生在抗原刺激后外周淋巴器官生发中心的B细胞。体细胞高频突变的主要方式是点突变，常发生在V区的CDR区，不仅能增加抗体的多样性，而且可导致抗体的亲和力成熟。 （三）B细胞在中枢免疫器官中的分化发育 B细胞在骨髓中的发育经历了祖B细胞（pro(B cell）、前B细胞（pre(B cell）、未成熟B细胞（immature B cell）和成熟B细胞（mature B cell）等几个阶段。 1．祖B细胞 。 2．前B细胞 前B细胞经历大前B细胞（large pre(B cell）和小前B细胞（small pre(B cell）两个阶段。大前B细胞可合成完整μ链，表达pre(B受体。pre(B受体可抑制另一条重链基因的重排（等位基因排斥），促进B细胞的增殖和进一步发育。小前B细胞的轻链基因发生V-J重排，但依然不能表达功能性BCR。 3．未成熟B细胞 未成熟B细胞可以表达完整mIgM，此时未成熟B细胞如受抗原刺激，非但不能活化、增殖，反而引起未成熟B细胞发生凋亡而导致克隆清除，形成自身免疫耐受。 4．成熟B细胞 成熟B细胞又称初始B细胞（naive B cell）。成