代料块栽香菇的养基配制的技术方法.docVIP

代料块栽香菇的培养基配制的技术方法 　　香菇体菌种的培育，一般有孢子分离法、组织分离法和蒸水分离法三种。孢子分离法是有性繁殖，菌种生活力强，但变异率高，一般难掌握，选育新品种时可采用此法。组织分离法及菇木分离法系无性繁殖，种性比较稳定、而且简便易行，生产上应用较多。 　　1培养基配制的原理 　　培养基是香菇菌丝体生长发育的基质、可以提供香菇菌丝体生长发育所必需的水分、碳源、氮源、各种元素和生长因素，使菌丝体能正常、健壮地生长。 　　a.水分：香菇菌丝中含有大量的水分。水分不仅是菌丝细胞原生质的主要成分，而且菌丝的一切生理活动均需在有水的情况下进行。因此，在配制各级培养基时，均要加入一定量的水分。 　　b.碳源：单糖(葡萄糖)、双糖(蔗糖、麦芽糖)、多糖(淀粉)都是香菇菌丝能够利用的有机碳源。一般来说，碳素是菌丝细胞中有机物的基本元素，并且也是能量的来源。 　　c.氮源：氮素是构成菌丝细胞中的蛋白质和核酸的主要元素，而蛋白质和核酸又是细胞质和细胞核的重要成分，生命活动中起着重要的生理作用。有机氮(氨基酸、蛋白质、尿素)和氨态氮(硫酸铵)都是菌丝细胞氮的来源。 　　d.无机盐类：菌丝所需的无机盐类数量很少，但在其生命活动中都是不可缺少的。在配制培养基时，要加入少量的磷、钾、硫、钙、镁等。培养基中加入磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钙等，可满足对上述元素的要求。 　　e.生长因素：能调节香菇菌丝代谢活动的微量有机物，称之为生长因素。一般用作碳源的天然成分，如马铃薯、麦芽汁、麸皮、米糠等都含有丰富的生长因素，无需另加。维生素B1可促进香菇菌丝生长，制斜面培养基时可加入少量。 　　f.凝固剂：常用的凝固剂为琼脂(洋菜)，是由石花菜提制而成。培养基中各种营养物质的比例对香菇菌丝生长的影响很大。要根据香菇菌丝生长对各种营养物质的需要按比例配制。要注意对培养基pH值的调节。 　　2培养基配制的方法 　　香菇菌种分为母种、原种和栽培种三种。 　　a.母种培养基的制作配方： 　　马铃薯200克;葡萄糖20克;琼脂18～20克;水1000毫升(pH值5.5～6) 　　该配方适合香菇及多种食用菌分离和培育母种之用。如果作保藏菌种用，在配方中可再添加磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，维生素B110毫克。 　　制法：选择质量好的马铃薯洗净去皮(已发芽的要挖去芽及周围一小块)，将其切成薄片，称取200克。放入铝锅中，加入清水1000毫升，加热煮沸，维持30分钟，用四层纱布过滤，取其汁液，然后将琼脂放在水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部溶化(加热过程中要用玻璃棒不断搅拌，以防溢出和焦底)，最后加入葡萄糖，并且热水补足1000毫升，测定并调节pH值(用5%的稀盐酸或5%的氢氧化钠溶液)到所需范围内。配制好的培养基要趁热分装入试管，装入量约为试管长度的1/5，装管时要注意勿使培基沾附试管口。分装完毕塞上棉塞，棉塞要求松紧适度，塞入长度约为棉塞总长度的2/3左右，使之既有利通气又能防止杂菌侵入。 　　塞好棉塞后，把试管直放在小铁丝筐中，盖上油纸或牛皮纸，用绳扎好，或用绳子把试管扎成几捆，棉塞部分用牛皮纸包扎好，竖直放入高压灭菌锅内，进行灭菌，在1.5公斤/厘米2压力下维持30分钟。 灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，再撰成斜面，以防冷凝水积聚过多。摆斜面时，先在桌上放一木棒，将试 管逐支斜放，使斜面长度不超过试管总长度的 1/2，冷却凝 固后，即成斜面培养基。 　　灭菌后的斜面培养基，要进行无菌测定，可从中取出2～3支，放入30℃左右的恒温箱中培养3天，培养后表面如 仍光滑，无杂菌出现，就可供接种。多次制作后，已有把握，可不做无菌测定试验。 　　高压灭菌操作步骤和注意事项： 　　(Ⅰ)在灭菌锅内加水至水位标记高度，首次使用需先进行一次试验，水过少易烧干造成事故，水过多棉塞易受潮。 　　(Ⅱ)放火锅内的材料，不宜太挤，否则会影响蒸汽的流通和灭菌效果。体积大的瓶子，要分层放置或延长灭菌的时间。 　　(Ⅲ)盖上锅盖，同时均匀拧紧锅盖上的对角螺旋，勿使漏气，关闭气阀。 　　(Ⅳ)点火、逐渐升温。水沸后，待锅内压力升至0.5 公斤/厘米2时，逐渐开大放气阀，放净锅内冷空气至压力降至0，再关闭放气阀。如不放尽冷空气，即使加大至所需压力，而温度达不到应有的程度，也不能达到彻底灭菌的要求。 　　(V)继续DO%至所需压力时，开始记灭菌时间，调节火力大小，始终维持所需压力至一定时间。 　　(Ⅵ)停火。让压力自然回降至0时，打开放气阀。 　　(Ⅶ)打开锅盖，用木块垫在盖下，让蒸汽渐渐溢出，借余热烘干棉塞。 　　(Ⅷ)取出已灭菌的材料，并清除剩水，以防锅底锈蚀。 　　b.原种培养基的制作 　　配方甲： 　　锯木屑78%;米糠(或麸皮)20%;蔗糖1%;硫酸钙(石膏粉)1%;水适量;