1.1基因工程1工具浅析.pptVIP

专题一 基因工程 限制酶作用过程 DNA连接酶的作用过程 * * 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的概念 原理 目的 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 培育新的生物类型和产品 基因重组 基因工程概念的分析 分子手术刀-- 分子缝合针-- 分子运输车-- 限制性核酸内切酶（限制酶） DNA连接酶 载体 二、 DNA重组技术的基本工具 P4 1、限制酶 ── “分子手术刀” （1）、来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来。 约4000种限制酶。 （2）、种类： 能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 （3）作用： （4）结果： 形成两种末端 黏性末端 ECORI 平末端 SmaI 点击播放 EcoR 1 黏性末？端平末端？ 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端。当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2、 DNA连接酶——“分子缝合针” （1）来源 （来自大肠杆菌） （来自T4噬菌体） E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 （2）作用： E.coliDNA连接酶 —— T4 DNA连接酶—— 　连接黏性末