第6课：DNA密码剖析.pptVIP

CAP-cAMP在CAP位点上与RNA pol的相互作用 * 美国生物化学家。1927年4月10日生于纽约州纽约市。尼伦伯格曾在佛罗里达大学学习，1948年毕业，其后继续在密执安大学学习，1957年他在该校获得哲学博士学位。此后，他进入国立卫生研究院。进入六十年代后，生物化学领域中突出的课题是遗传密码问题。克里克和其他学者已经确定了DNA的结构，而且对形成蛋白质的主要机制也已有所认识。沿着DNA链的三种核苷酸的每一组合对应着一种特定的氨基酸，它是借助于信使RNA，转移RNA和核糖核蛋白体进入蛋白质链中一定的位置的，这已为霍格兰的研究所证实。现在的问题是：哪一个DNA三联体相应于哪一个氨基酸？尼伦伯格在1961年有了突破。他利用合成的RNA作信使RNA。这种合成的RNA是按奥乔亚的方法构成的，它只有一种核苷酸，尿嘧啶核苷酸，因此，其结构为…UUUUUU…。其中唯一可能的核苷酸三联体是UUU，当它形成只含有苯丙氨酸这种氨基酸时，显然UUU就与苯丙氨酸相对应，这样，在密码“词典”中的第一个条目就被确定了。其他的生物化学家立即参加了探索，因此相继确定了别的三联体和各氨基酸之间的关系。不到十年，整个密码“词典”完成了。1968年尼伦伯格同科兰纳和霍利终于一起分享了诺贝尔医学和生理学奖。 * CRP也称为分解代谢物激活蛋白（CAP），它也是很多其它与分解代谢有关的操纵子的激活蛋白，包括乳糖操纵子、阿拉伯糖操纵子、半乳糖操纵子和麦芽糖操纵子等近100个以上的启动子受到它的激活。这种由同一种调控蛋白调节多个操纵子基因表达活性的调控方式被称为调谐子。在这些操纵子的附近，都含有CAP结合位点。以乳糖操纵子为例，它的CAP结合位点位于Plac上游。序列分析表明，CAP位点序列与操纵基因的序列一样，含有两段反向重复序列（GTGAG），而每一段即是CAP的半个结合位点。这样的性质特别适合二聚体的CAP-cAMP与其结合，因为一个单体与其中的一段反向重复序列结合。与阻遏蛋白一样，CAP也是通过螺旋-转角-螺旋这种DNA结合模体在大沟与结合位点结合。 CAP-cAMP同DNA结合后，可以引起DNA的弯曲，增强RNA pol与DNA的结合能力，并协助DNA双螺旋的解链，使RNA pol的转录活性提高20~50倍。在CAP未与cAMP结合时，它是没有活性的。当cAMP浓度升高时，CAP与cAMP结合并发生构象的变化而被活化，能以二聚体的方式与特定的DNA序列结合。相反，当有葡萄糖可供分解利用时，cAMP浓度降低，CAP不能被活化，乳糖操纵子的结构基因表达下降。 * DNA密码 * 一个基因一个酶理论 1902年，伽罗德（Garrod）研究黑尿病，有人认为是细菌引起的，但一些新生儿出生几小时后即表现此病，而此时细菌系尚未建立，因此排除。此病是一种遗传缺陷，通过家谱的研究，发现有遗传倾向，其中60%是表兄妹结婚。 这种性状是由隐性孟德尔因子（基因）控制的。只有当基因纯合时，才能表现出黑尿病症状。 * 1908年，进一步指出，这种隐性基因纯合的个体不能产生一种特殊的蛋白质即酶(尿黑酸氧化酶），因此尿黑酸不能分解，尿中积累，遇空气被氧化成黑色——“先天性代谢错误”。 伽罗德关于基因功能的研究大大超前于他所处的时代，因此当时没有引起太多的注意。直到20世纪40年代初，由于比德尔等人的工作，人们才对基因的生理功能有了突破性认识。 * 比德尔的一个基因一个酶理论 1935年，摩尔根实验室的博士后比德尔与访问学者伊佛路斯对果蝇眼色性状的遗传机理进行研究。 基因如何决定色素？ 比德尔 * 他俩采用移植技术，把突变型果蝇幼虫的眼睛成功移植到正常的果蝇幼虫中，发现果蝇都有正常的褐红色。 疑问：突变型果蝇的基因未变，为何眼褐 红色？ * 比德尔的结论： 正常细胞含（色素）某种化学物质，突变体缺乏，移植后，突变体得到了这种物质，因此表型正常。 推测：基因导致一种化学物质的产生，该物质又决定基因所表达的性状。基因的作用与特定化学物质的产生有关。 * （三）“一个基因一个酶”的假说 1941年比德尔和塔特姆等提出的。红色面包霉各种突变体的代谢功能异常往往是因为一种酶的缺陷，产主这种酶缺陷的原因是单个基因的突变，提出了“一个基因一个酶”的学说。说明基因是通过控制酶的合成决定代谢过程和性状发育的。 塔特姆 比德尔 * 红色面包霉营养缺陷型 突变体的筛选 * 比德尔开辟了一个崭新的思路——性状的表达方式都可归纳为某种生化性质的表达，为遗传学与生物化学的结合构筑了桥梁。也揭开了人类认识基因功能的序幕。 * 基因与蛋白质的关系