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第一节基因表达调控的基本概念 一、基因表达调控呈现多层次和复杂性 第三节  原核基因表达调节 一、原核生物基因表达的特点 1. 只有一种RNA聚合酶。 2. 基因表达以操纵子为基本单位。 3. 转录和翻译偶联进行 4. mRNA翻译起始部位有特殊的碱基序列----SD序列。 5. 原核生物基因表达的调控主要在转录水平。 (1) 起始调控，即启动子调控； (2) 终止调控，即衰减子调控。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷, isopropylthiogalactoside) IPTG是实验室常用的强诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定。 安慰诱导物：如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物，如IPTG。 葡萄糖利用对乳糖操纵子的影响 第四节  真核基因表达调节 顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。 启动子、增强子、沉默子等 （二）反式作用因子是真核细胞中重要的转录调控蛋白 反式作用因子：DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控） 类别： 基本转录因子(general transcription factors) 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子 如TATA box结合因子 TFⅡD；GC box结合因子SP1 等。 特异转录因子 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达 OCT-2：在淋巴细胞中特异性表达，识别Ig基因的启动子和增强子。 DNA结合域(DNA-binding domain) 螺旋-转折-螺旋(helix-turn-helix) 锌指结构(zinc finger motif) 碱性-亮氨酸拉链 (leucine zipper) ② 锌指结构 (zinc finger) ③ 碱性-亮氨酸拉链(basic zipper,bzip) RNA 干扰 (RNAi) RNAi是继2001年人类基因组测序完成后，科学界最为瞩目的技术，它掀起了科学界的一场大风暴，而且趋势愈演愈烈。 2002年，RNAi被《Science》评为当年的十大科学进展之首。 2006年，安德鲁·菲尔(Andrew Fire) 和克雷格·梅洛(Craig Mello)，因发现RNA干扰现象获2006年诺贝尔生理学和医学奖。 生物技术的蓝月亮 蓝月亮：既能获得诺贝尔奖又值几十亿美元的科学成就 生物技术产业的蓝月亮： 基因重组技术：安进公司因为最先研发出EPO，而成为年产值超过55亿美元的生物产业巨头。 单克隆抗体：单克隆抗体分子能够准确找到病变组织后再将其毁灭。单克隆抗体类药物每年给基因技术公司带来22亿美元的销售额。 快速发展的RNA干扰技术 RNAi激起科学家们研究热情的原因 第一，它可以缩短人类对人类基因功能的认识时间，从十几年缩至几年； 第二，科研人员有望利用这种技术获得使致病基因失活的新型基因药物，而基因药物一直是生物技术界追逐的金杯。  本章要点 基本概念： 组成性表达，管家基因，诱导，阻遏，操纵子，顺式作用元件，反式作用因子，启动子，增强子，siRNA, RNAi 乳糖操纵子的调控机理 真核基因组的结构特点 真核生物转录因子的DNA结合结构域的主要模式： 螺旋-转折-螺旋，锌指结构，碱性-亮氨酸拉链 （三）mRNA转录激活需要转录起始复合物的形成 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成转录起始复合物。 PolⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP DNA TATA EBP TBP 图13-9 转录起始复合物的形成 Flash 六、转录后水平的调节也是基因表达调控的重要环节 （一）hnRNA加工成熟的调节 （二）mRNA运输、胞浆内稳定性的调节 加工过程包括加帽、加尾、剪接、碱基修饰和编辑等。 通过与蛋白质结合形成核蛋白体复合物(ribonucleoprotein, RNP)进行。 七、基因表达在翻译水平以及翻译后阶段仍然可以受到调节 （一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行 蛋白质合成速率的快速变化在很大程度上取决于起始水平，通过磷酸化调节翻译起始因子（eukaryotic initiation factor, eIF）的活性对起始阶段有重要的控制作用。 （二）RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节 （三）对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达 （四）小分子RNA对基因表达的调节十分复杂 小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA) 是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度(21-23个碱基)和特定序列的小片段RNA。