新医学遗传学实指导3.doc

实验室规则 医学遗传学是高医学院校本科生的重要生物医学课程，实验医学科学的展与实验技术的不断提高和创新密不可分，。 实验一 人类的皮纹分析 一 实验原理 皮纹学是一门起源于西方的应用科学皮纹学（Dermatoglyphics）系指手指、手掌、脚掌等处皮纹的呈现态。皮纹包括指纹、掌纹和足纹。指纹是在三个月的胎儿时期形成的形成后终生不变（Arch，A）（loop，L）（whorl，W）145；正常女性（46，XX）嵴纹总数的平均数为127；核型为48，XXYY的患者嵴纹总数的平均数为106；核型为47，XXY的患者嵴纹总数的平均数为114；核型为49，XXXYY的患者嵴纹总数的平均数为93；核型为49，XXXXY的患者嵴纹总数的平均数为49。 5 掌纹中atd角的测量 手掌分为六个区：大鱼际区、小鱼际区和四个指间区。大鱼际区位于拇指下方。小鱼际区位于小指下方。在食指、中指、无名指和小指的根部，都有由三个方向来的纹线集成的三叉点，分别标为a、b、c、d点。；先天愚型儿atd达70。附图和表 图1 指纹的各种类型 图2 指纹的嵴纹计数 图3 atd角、t位置变化及t距百分比示意图 实验二 人类染色体的核型分析 一 实验原理 任何生物都有特定的一套染色体，核型（karyotype）是指一个细胞内的全套染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像称为。通常是将显微摄影得到的染色体照片剪贴而成。正常细胞的核型能代表个体的核型。核型的研究对人类医学遗传研究及临床应用，对探讨动植物起源、物种间亲缘关系，鉴定远缘杂种以及生物染色体数目和结构变异的分析等方面都有重大意义。 染色体的特征以有丝分裂中期最为显著，所以一般都分析中期分裂相。随着染色体分带技术的发展，更为染色体核型的准确分析提供了有力的工具。根据染色体着丝粒位置的不同，可将染色体分为中央着丝粒染色体（m）、亚中着丝粒染色体（sm）、近端着丝粒染色体（st）、端着丝粒染色体（t）。人类体细胞的正常核型是含有46条染色体，男XY，女XX。 每套染色体的数目、形态特征（如两臂长度、着丝粒位置、随体的有无、染色体长度等）都是比较固定的，具有种的特异性。如将待检细胞的全套染色体按照Denver体制配对、分组排列后，分析其与正常核型的异同，就叫核型分析（karyotype analysis）。核型分析是遗传病临床诊断的一种常用工具，通常包括两方面的内容：一是确定物种的染色体数；二是辨析每条染色体的特征。 二 实验目的 1 掌握核型及核型分析的概念 2 掌握染色体核型分析的过程 3 掌握人类染色体的形态特征 三 实验材料、器具、试剂 材料：人血图片永久装片，染色体核型照片，擦镜纸，吸水纸 器具：剪刀，显微镜 试剂：二甲苯、香柏油 四 实验步骤 1 人类染色体形态观察 取人类染色体永久制片标本，先在低倍镜下选择合适的染色体中期分裂相，然后将镜头转到油镜下，分析观察每条染色体的形态特征，区分中央着丝粒、亚中着丝粒、端着丝粒染色体，并进行染色体计数。男性：46，XY; 女性：46，XX。 2 人类染色体的显微相片核型分析 把正常人中期染色体照片中的每一个染色体剪下来，并粘贴于核型分析版上。按 ISCN分组列号，配成23对，其中22对常染色体按染色体的长短（形态大小）用阿拉伯数字1～22作标记，两个性染色体用字母X、Y作标记自成一对。染色体又划分为A、B、C、D、E、F、G 7组，X染色体属C组，Y染色体属G组。分类方法按国际统一分类（表1）。 注意：在对染色体进行粘贴时，要把染色体的着丝粒粘贴到一条直线上，并且染色体的短臂朝上，染色体长臂朝下；对染色体进行分组时同一组的染色体排列在同一水平位置。 表1人类染色体分组特征 五 作业 1 对显微镜下观察到的人类染色体进行绘图。 2 C组和G组的染色体都有哪些特点？ 3 核型分析时，主要通过哪组染色体来辨别显微镜下的图像是女性核型，还是男性核型？ 4 按照下列图示，将对染色体显微照片核型分析的结果贴到作业与思考本上。 A ……………………… 将着丝粒排在此线上………… B ………………………………………………………… C ………………………………………………………… D …………………………………………………………… E …………………………………………………………… F …………………………………………………………… G …………………………………………………………… 实验三 人类X染色质的制备与观察 一 实验原理 1949年Barr等人在雌猫神经元细胞核中发现一种浓缩小体，但在雄猫中看不到这一结构。进一步研究发现食肉类、偶蹄类、灵长类（包括人类）等雌性动物的不同组织的间期细胞核中，均可看到这种显示性别差异的结构。现在我们通常称这种结构为巴氏小