(微生物学)8 微生物的遗传育种.ppt

原生质体融合 准性生殖 ①菌丝联结 ②异核体形成(质配) ③核配形成杂合二倍体 ④体细胞交换和单倍体化。 Infection of host cell by T2 phage Isolation of Mutants Pigmented and nonpigmented mutants Antibiotic-resistant mutants within the inhibition zone Genetic marker, such as the expression of b-galactosidase that produces the blue color 暗修复 诱变剂量 筛选方法 抗生素法 菌丝过滤法 夹层培养法 Replica Plating Technique: Isolation of Mutants Complete medium Minimal medium 逐个检出法 生长谱法 方法简便; 回变和污染不影响 结果 测定物质可为粉末 或纸片 测定一般应分两阶段: 第一阶段:测定是哪类物质的缺陷型; 第二节段:根据第一阶段确定的范围,进一步确定是哪种具体化合物的缺陷型; Transformation Mechanism of transformation(一) Mechanism of transformation(二) Transduction Complete transduction (完全普遍转导) Specialized transduction Specialized transduction Conjugation between different bacteria Structure of F plasmid Mechanism of conjugative transfer of plasmid DNA Mechanism of conjugative transfer of plasmid DNA Mechanism of conjugative transfer of plasmid DNA 诱变因子的复合处理及其协同效应 菌种 单 独 处 理 复 合 处 理 诱变剂 突变率% 诱变剂 突变率% 土曲霉 紫外线 21.3 X射线+紫外线 42.8 X射线 19.7 土曲霉 氮芥0.1% 不明显 氮芥+紫外线 11.0 紫外线 4.7 链霉菌 紫外线 31.0 紫外线+γ射线 43.6 γ射线 35.0 金色链霉菌 二乙烯三胺 6.06 二乙烯三胺+紫外线 26.6 (2U-84) 硫酸二乙酯 1.78 硫酸二乙酯+紫外线 35.86 紫外线 12.5 灰色链霉菌 紫外线 9.8 紫外线+可见光照射1次 9.7 (JIC-1) 紫外线+可见光照射6次 16.6 几个基本概念 基本培养基(minimal medium,MM):仅能满足某微生物的野生型菌株生长需要的最低成分组合培养基。 完全培养基(complete medium,CM):凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基。 补充培养基(supplemental medium,SM):凡只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合或半组合培养基。 五、营养缺陷型(Auxotroph)的筛选 诱变剂处理 淘汰野生型,“浓缩”营养缺陷型 细菌:青霉素法 真菌:制霉菌素法 丝状菌(真菌或放线菌):菌丝过滤法 检出缺陷型 夹层培养法 限量补充培养法 影印平板法 逐个检出法 鉴定缺陷型:生长谱法 六、基因重组 (Gene

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