胃癌论文：ha-microRNA-212调控组蛋白去甲基化酶RBP2抑制胃癌细胞增殖的初步研究.docVIP

胃癌论文：has-microRNA-212调控组蛋白去甲基化酶RBP2抑制胃癌细胞增殖的初步研究 【中文摘要】研究胃癌中可调节组蛋白去甲基化酶RBP2表达的特定MicroRNA,进而研究其对RBP2表达以及胃癌细胞增殖的影响和作用机制。方法：利用生物信息学方法,在TargetScan, miRanda和miRBase等miRNA数据库中分别预测能够靶向调节RBP2的miRNA;将各数据库预测结果进行聚类分析,寻找在各个数据库中均存在的特定miRNA作为研究对象。在19对中国人胃原位癌及对应的癌旁正常组织中分别利用QRT-PCR和免疫组化法检测miR-212和RBP2的表达情况。利用分子克隆的方法分别构建miR-212高表达质粒pS-miR-212、抑制niR-212表达质粒anti-miR-212、荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT/RBP2/3’UTR以及三种突变荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT/RBP2/3’UTR mutantl(结合区1突变),2(结合区2突变),3(结合区1,2均突变)。利用脂质体将pS-miR-212、anti-miR-212以及两者的对照质粒分别转染到AGS,BGC-823和GES-1细胞中,转染48小时后利用Trizol提取其总RNA。利用miR-212特异RT及PCR引物分别进行逆转录和荧光定量PCR来检测各质粒对胃癌细胞miR-21