土壤耗氧微生物分离与纯化操作步骤.docVIP

土壤耗氧微生物的分离与纯化操作步骤 关键词：标准物质 标准物质网 标准物质中心 北京标准物质网 1．稀释涂布平板法 1)倒平板 将肉膏朊胨琼脂培养基、高氏号培养基、马丁氏培养基加热溶化，待冷却至55～60时，在高氏号培养基中加入10％酚数滴，在马丁氏培养基中加入链霉素溶液(终浓度为30Hg／mL)，混均匀后分别倒平板，每种培养基倒三皿。 倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角烧瓶置火焰旁边，左手将试管塞或瓶塞轻轻地拔出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手撑边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞，也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住[图3—8(a)]。如果试管内或三角烧瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中[图3—8(c)]。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15mL[图3—8(c)]，加盖后轻轻摇动培养皿[图3—8(b)]，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。 2)梯度法制备土壤稀释液 称取土样10g，放人盛90mL无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇约20min，使土样与水充分7昆合，将细胞分散制成10-1浓度(图3—9A)。用一支1mL无菌吸管从中吸取1mL土壤悬液加入盛有9mL无菌水的大试管中充分混匀[图3—8(b)]，然后用无菌吸管从此试管中吸取1mL[无菌操作见图3—8(c)]加入另一盛有9mL无