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- 2016-10-16 发布于重庆
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由MACHEREY
转染实验技巧(如下信息全部由客户提供)
DNA体外转染试剂
如何准备转染所需的质粒DNA
转染效率受到诸多因素的影响,除了细胞、培养基和载体等影响因素外,另外一项非常重要的因素便是DNA的质量。为了比较不同厂家的转染效率,我们分别从三家不同的供应商购买了质粒制备试剂盒来制备pEGFP-N3质粒DNA,并通过不同的方法将制备的pEGFP-N3质粒转运至NIH-3T3细胞。
pEGFP-N3质粒分别通过Endofree Maxi Piasmid Kit(Qiagen),PerfectPrep Endofree Piasmid Maxi Kit(5 PRIME,inc)及NucleoBond DNA Maxi Kit(MACHEREY-NAGEL GmbHCo.KG)制备,我们测定了230,260,280及320nm的吸光值检测DNA的质量。通过上述三种方法制备的DNA质量如下:MACHEREY-NAGEL>5Prime>Qiagen。
pEGFP-N3由PolyJet?DNA转染试剂运至NIH-3T3细胞。转染效率的高低与DNA的质量相符,由MACHEREY-NAGEL纯化DNA对应的转染效率最高,而由Qiagen纯化DNA对应的转染效率最低。因此,MACHEREY-NAGEL GmbH Co.KG的质粒制备试剂盒被认为是制备转染级别DNA的最佳选择。
How to prepar
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