病毒可以危害动物植物造成严重病状，而造成危害之病毒的检测为.docVIP

【試題一】植物病原菌種類之判別 組別： 實驗背景 病毒可以危害動物、植物造成嚴重病狀，而檢測造成危害之病毒的種類為重要研究之一，利用血清學之技術（酵素連結免疫分析法）普遍被使用方法之一。酵素連結免疫吸附法（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, 簡稱ELISA）利用抗原、抗體之間專一性鍵結之特性，對檢體進行檢測；由於結合於固體承載物(塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍具有免疫活性，因此經過鍵結後，配合酵素呈色反應，即可顯示特定抗原是否存在，可進行定性分析，或利用呈色之深淺，藉由酵素免疫微盤分析儀ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值(OD595 nm值)，可進行定量分析。 操作步驟為: 將待測檢體固著（coating）於塑膠孔盤上，經靜置後洗去多餘檢體。 加入一次抗體，檢體中若含有待測之抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。 經靜置後洗去多餘未鍵結一次抗體後，加入帶有酵素之二次抗體，與一次抗體鍵結。 經靜置後洗去多餘未鍵結二次抗體，加入酵素受質使呈色反應，以肉眼觀察呈色結果或以儀器讀取塑膠盤中的吸光值(OD595 nm值)，實驗組OD值大於對照組OD值兩倍以上，視為正反應。 今有蘭花農民發現培育的蝴蝶蘭葉片，產生嵌紋病毒感染病徵，送請檢驗機構以酵素連結免疫吸附法（ELISA）檢測。 1. 檢驗機構用三種抗體：抗體1（東亞蘭嵌紋病毒抗體），抗體2：（胡瓜嵌紋病毒抗體），抗體3（齒舌蘭輪班病毒抗體）依上述步驟進行檢測，經加入酵素受質使呈色反應，經過20、40、60分鐘以酵素免疫微盤分析儀ELISA reader）判讀，其結果如表一所示，請就表一結果作定性分析。 組別： 表一、蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒病徵樣品，以不同抗體進行酵素連結免疫吸附法（ELISA）檢測結果 判讀時間(分鐘) OD值 抗體1（1 μg/ml） 抗體2（1 μg/ml） 抗體3（1 μg/ml） 檢測樣品 對照組 檢測樣品 對照組 檢測樣品 對照組 20 0.05 0.04 1.20 0.02 0.30 0.02 40 0.04 0.03 2.01 0.08 0.50 0.05 60 0.03 0.02 2.82 0.14 0.65 0.06 2. 檢驗機構用抗體2（胡瓜嵌紋病毒抗體），亦進行酵素連結免疫吸附法不同抗體濃度試驗，分別用1 μg/ml、0.5 μg/ml、0.25 μg/ml、0.12 μg/ml抗體濃度進行檢測，經加入酵素受質使呈色反應，經過20、40、60、80分鐘以酵素免疫微盤分析儀ELISA reader）判讀，其結果如表二所示，請就表二結果作定量分析。 表二、蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品，以不同抗體濃度進行酵素連結免疫吸附法（ELISA）檢測結果 判讀 時間 (分鐘) OD值 抗體濃度 （1 μg/ml） 抗體濃度 （0.5 μg/ml） 抗體濃度 （0.25 μg/ml） 抗體濃度 （0.12 μg/ml） 檢測 樣品 對照 組 檢測 樣品 對照 組 檢測 樣品 對照 組 檢測 樣品 對照 組 20 1.2 0.02 1.0 0.02 0.6 0.02 0.3 0.02 40 2.0 0.08 1.9 0.05 0.9 0.05 0.5 0.01 60 2.8 0.14 2.7 0.06 1.0 0.02 0.6 0.02 80 3.2 0.21 3.1 0.02 1.1 0.04 0.7 0.01 組別： 結果與討論 定性分析： 蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品，以不同抗體進行酵素連結免疫吸附法（ELISA）檢測結果，為感染何種病毒？（5分） 說明原因。（7分） 組別： 定量分析 蝴蝶蘭葉片產生嵌紋病毒感染病徵樣品，以不同抗體濃度進行酵素連結免疫吸附法（ELISA）檢測結果，以何種抗體濃度進行檢測，最為適當？（5分） 說明原因。（8分） 【試題二】 酵母菌 組別： 實驗背景 酵母菌於發酵工業上應用廣泛，除釀酒、麵包製造等大宗傳統發酵產品外，特定酵母菌可製成單細胞蛋白，作為蛋白質營養劑或製成飼料供動物食用。部份酵母菌甚可生產一些高價產物如泛素Q10、超氧歧化酶(superoxide dismutase)及工業上各式有用的酵素、蛋