土壤全氮测定nau.docVIP

土壤全氮测定—半微量开氏法［1，6］ 4.1.2.2.1 方法原理 样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。 包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。 在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳，生成CO2，从而分解有机质。 2H2SO4＋C→H2O＋2SO2↑＋CO2↑高温 样品中的含氮有机化合物，如蛋白质在浓H2SO4的作用下，水解成为氨基酸，氨基酸又在H2SO4的脱氨作用下，还原成氨，氨与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。 Se 2H2SO4+Se→H2SeO3+2SO2↑+H2O (亚硒酸) 2SeO3→SeO2+H2O SeO2+CSe+CO2 由于Se的催化效能高，一般常量法Se粉用量不超过0.1-0.2g，如用量过多则将引起氮的损失。 (NH4)?2SO4+ H2SeO3→(NH4)2SeO3+ H2SO4 3(NH4)2SeO3→2NH3+ 3Se + 9H2O + 2N2↑ 以Se作催化剂的消煮液，也不能用于氮磷联合测定。硒是一种有毒元素，在消化过程中，放出H2Se，H2Se的毒性较H2S更大，易引起人中毒，所以实验室要有良好的通风设备，方可使用这种催化剂。 CuSO4 当土壤中有机质分解完毕，碳质被氧化后，消煮液则呈现清澈的蓝绿色即“清亮”，因此硫酸铜不仅起催化作用，也起指示作用。同时应该注意开氏法刚刚清亮并不表示所有的氮均已转化为铵，有机杂环态氮还未完全转化为铵态氮，因此消煮液清亮后仍需消煮一段时间，这个过程叫“后煮”。 消化液中硫酸铵加碱蒸馏，使氨逸出，以硼酸吸收之，然后用标准酸液滴定之。 (NH4)2SO4+ 2NaOH→Na2SO4+ 2NH3+2H2O NH3+H2O→NH4OH NH4OH+H3BO3→NH4·H2BO3+H2O 滴定过程的反应： 2NH4·H2BO3+H2SO4→(NH4)2SO4+2H3BO3 4.1.2.2.2 主要仪器 消煮炉；半微量定氮蒸馏装置(图4-2)；半微量滴定管(5mL)。图4-2半微量蒸馏装置 1.蒸馏瓶；2.冷凝器；3.承受瓶；4.分水筒；5.蒸汽发生器；6.加碱小漏斗；7、8、9.螺旋夹子；10.开关。 4.1.2.2.3 试剂 (1)??硫酸：ρ=1.84g·mL-1，化学纯； (2)??10 mol·L-1NaOH溶液：称取工业用固体NaOH 420g，于硬质玻璃烧杯中，加蒸馏水400mL溶解，不断搅拌，以防止烧杯底角固结，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，防止吸收空气中的CO2，放置几天待Na2CO3沉降后，将清液虹吸入盛有约160mL无CO2的水中，并以去CO2的蒸馏水定容1L加盖橡皮塞。 (3)??甲基红－溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL乙醇中（注1）。 (4)??4.20g·L-1H3BO3-指示剂溶液：20g H3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H H3BO3溶液中加入甲基红－溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜鲜配，不宜久放。 (5)??K2SO4∶CuSO4∶Se＝100∶10∶1即100g K2SO4(化学纯)、10g CuSO4·5H2O(化学纯)和1g Se粉混合研磨，通过80号筛充分混匀(注意戴口罩)，贮于具塞瓶中。消煮时每毫升H2SO4加0.37g混合加速剂。 (6)??0.02 mol·L-1(1/2H2SO4)标准溶液：量取H2SO4（化学纯）、无氮、ρ=1.84 g·ml-1）2.83mL，加水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼砂标定之。 (7)???0.01 mol·L-1(1/2 H2SO4)标准液：将0.02 mol·L-1?(1/2 H2SO4)标准液用水准确稀释一倍。 (8)??高锰酸钾溶液：25g高锰酸钾（分析纯）溶于500mL无离子水，贮于棕色瓶中。 (9)11硫酸（化学纯、无氮、ρ=1.84 g·ml-1）：与等体积水混合。 (10)??还原铁粉：磨细通过孔径0.15mm（100号）筛。 。 4.1.2.2.4 测定步骤 (1)称取风干土样（通过0.149mm筛）1.0×××g［含氮约1mg（注2）］，同时测定土样水分含量。 (2)土样消煮 不包括硝态氮和亚硝态氮的消煮：将土样送入干燥的开氏瓶（或消煮管）底部，加少量无离子水（约0.5～1mL）湿润土样后(注3)，加入加速剂2g和浓硫酸5mL，摇匀，将开氏瓶倾斜置于300