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一、细胞融合与细胞杂交 动物免疫 分离B淋巴细胞 细胞融合——淋巴细胞杂交瘤的制备 杂交瘤细胞的筛选 杂交瘤细胞的克隆 单克隆抗体的提取 世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题: b ⑴图中 a过程为 。通过a过程形成 的重组细胞核遗传物质与质遗传物质各来自哪里? ⑵实施a时,所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是: 。 ⑶b过程细胞分裂的方式是 ,此过程是否进行细胞分化? (答“有”或“无”) ⑷图中c所指过程为 ,图中d指的是克隆绵羊“多莉”经过在母体子宫内 后 。 ⑸“多莉”面部的毛色和性别与 绵羊相同,请根据遗传学原理说明判断依据: 。 ⑹若不考虑环境因素影响,多莉的性状是否全部像以上绵羊?为什么? (7)植物组织培养之后,克隆绵羊培育成功,证明动物 。 黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊卵 腺细胞核 重组细胞 早期胚胎 另一头母绵羊子宫 克隆绵羊多莉 a b c d 细胞核移植 具有调控细胞核发育的细胞质物质 有丝分裂 有 胚胎移植 妊娠 出生 白面 “多莉”绵羊的核基因和性染色体全部来自白面绵羊 细胞核也具有全能性 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状 6、若不考虑环境因素影响,克隆羊 的性状全部像白面绵羊吗?原因是? 右图技术具有多种用途,但是不能( ) A.有选择地繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优良个体 C.用于保存物种 D.改变动物的核基因 在现有技术条件下,还不能将从动物 体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成 一个新个体,而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细 胞中才能发育成新个体,你认为原因最可能是( ) A.卵细胞大,便于操作 B.卵细胞含有的营养物质多 C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D.重组细胞才具有全能性 D C 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状 细胞贴壁过程 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。 接触抑制 * * * * 选择适宜的细胞生长支持物 从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养.但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难.无限细胞系,转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易.其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程,期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排出自己的代谢产物和其它一些物质,其中有排泄物,也有促细胞生长物质.有人称之为化学信使,具有促克隆细胞生长作用,实则为生长因子类物质.单细胞同化营养液能力不如群体细胞强;初代培养细胞,有限细胞系(--倍体细胞)不如无限细胞系,转化细胞和肿瘤细胞强.转化细胞和肿瘤细胞强的原因,可能与它们有自泌(Autocrine)和内泌(Endocrine),即自己合成生长因子能力有关.凡对培养环境有较大适应性和具有较强独立生存能力的细胞,均易做细胞克隆.克隆细胞时,要把细胞先制备成单细胞悬液,再接种培养在底物上,让细胞单独生长.适应性较大和活力好的细胞能增殖形成细胞小群(Colony)克隆.细胞群单个细胞形成克隆的百分数称克隆形成率或克隆率(Cloning Efficiency),也称接种率(Seeding Efficiency).两词都可用于表示细胞生活力和独立生长能力,但克隆形成率含义比接种率更为确切. * * 1.怎样获得能够产生抗体的B淋巴细胞? 2.骨髓瘤细胞具有什么特性? 3.科学家期望杂交瘤细胞有怎样的性状? 4.细胞融合有哪几种情况发生?怎样筛选出杂交瘤细胞? 5.杂交瘤细胞在体外培养要用到那种细胞工程技术? 机械消化或者胰酶消化 一、动物细胞、组织培养 1、什么方法取得离体的单个动物细胞? 2、离体的动物细胞能否正常的生活、表现出正常的生命活动? (胰蛋白酶) (1)贴壁生长: 悬浮液中分散的细胞紧贴培养瓶内壁才能生长。 (2)接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂。 (3)正常的生命活动: 生长、分裂、有规律的衰老、死亡等现象。 2、适宜的环境条件 无菌、无毒环境:加抗生素,定期更换培养液 适宜
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