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卵细胞 C母绵羊子宫 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 多莉羊的培育过程 (一)动物细胞核移植 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物:用核移植的方法得到的动物。 (三)分类: 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复 全能性容易 细胞分化程度高,恢复 全能性困难 (二)原理: 动物细胞核具有全能性。 去核卵细胞 供体体细胞 (电刺激) 细胞融合 重组细胞 早期胚胎(重组) 与供体遗传物质基本相同的个体 代孕雌性个体 胚胎移植 卵母细胞培养(减二中) 无性生殖 (四)体细胞的核移植过程 (供体)体细胞培养 去核 注入 生出 讨论 1,克隆包括几个阶段? 2,为什么要采用M2期的卵母细胞作为受体细胞? 3,为什么要选用传代10代以内的细胞作为供体细胞? 核移植和胚胎移植 卵细胞大,易于操作;营养丰富,为发育提供 充足的营养,含有能激发细胞核全能性的物质。 遗传物质稳定 5, 动物克隆说明了什么? 4,克隆动物是对体细胞供体动物百分百的复制吗? 不,遗传现状不完全相同。细胞核的DNA 来自供体细胞,核外DNA主要来自受体细胞; 并且性状是基因与环境共同作用的结果。 动物细胞核具有全能性 (五)、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、生产医用蛋白质 及组织器官的移植的供体 (六)、体细胞核移植技术存在的问题 1、克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚。 2、克隆技术效率低,畸形率高、死亡率高、易出 现早衰等问题。 3、生产克隆动物费用昂贵。 动物细胞融合 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 细胞融合与融合诱导细胞融合物质 诱导剂:病毒、聚乙二醇诱导细胞融合的病毒必须灭活。 思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活? 二、单克隆抗体 什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。 单克隆抗体 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:特异性强、灵敏度高 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高。 应用主要有: 1、临床诊断 2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 * 人耳鼠 “人耳鼠”再出风头 2001年,一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是,这只小白鼠的背上,竟长着一只几乎与身子一般大小的“人耳”。这只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。 在京展出的数天,尽管门票高达20元,但还是有将近20万人,心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。 人耳鼠的出现,透露了怎样的信息? 皮肤烧伤,如果创面很小(不大于硬币)只要保持清洁,甚至深度烧伤,也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大,常常需要植皮。植皮需要的健康皮片,可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位(自体植皮),也可取自其他活人或尸体(异体植皮)等。自体植皮是永久性的,取自其他人或动物的植皮是暂时性的,是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施,10~14天后就要被身体排斥。 如果一个大面积烧伤的病人来说,自体皮肤有限,其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤? 专题2.2动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 (一)、概念 是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长
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