2DNA的结构-2总结.pptVIP

复性的条件 i、一定的盐浓度 以消除两条链中磷酸基团之间的斥力。常用0.15—0.50 mol/L NaCl。 ii、温度适当高 防止随机形成链内氢键，但又不能太高，否则不能形成氢键和稳定的双链。最适温度为Tm－ 25℃。 影响复性速度的因素 i、DNA浓度 浓度越高互补链碰撞机会↗，复性速度↗。 ii、DNA片段大小 大的线性单链复性慢。 iii、温度:Tm-25℃,一般在60℃左右 iv、阳离子浓度（＜0.4mol/L） 阳离子能降低带负电荷的DNA链之间的斥力。盐浓度↗，复性速度↗， 0.18~0.2M Na+ 可消除polydNt 间的静电斥力。 V、 DNA的复杂性 简单分子易复性，序列越复杂，复性时间越长，速度越慢。真核生物DNA复杂，复性需较长时间。 四、复性动力学曲线 双链DNA的复性过程为： dsDNA 2ssDNA K1 K2 动力学公式为： dC/dt = -K2C2 dC/C2 = -K2dt 上式积分得： C/C0=1/(1+K2C0t) C0t曲线 C/C0=1/(1+K2C0t) 以C/C0对C0t