01细菌的形态学检查解析.ppt

　实 验 一 细菌的形态学检查 目的要求 掌握细菌的基本形态与特殊结构。 掌握细菌涂片的制作及革兰染色法，并了解其实际意义。 掌握显微镜油镜头的使用与保护。 实验内容 1、葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。 2、载玻片、接种环、酒精灯。 3、革兰染色液一套、吸水纸、香柏油。 4、显微镜。 1.为什么革兰氏阳性菌染为紫色,而阴性菌染成红色？ (1)革兰氏阳性菌等电点在PH2~3,比阴性菌(PH4~5 为低.因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性 菌强. (2)革兰氏阳性菌含有核糖核酸镁盐,易和结晶紫- 碘复合物结合而不易脱色. (3)革兰氏阳性菌细胞壁及细胞膜的通透性较低. 因此,染料和碘的复合物不易为乙醇所溶出， 所以阳性菌仍保持原来的紫色；而革兰氏阴性菌细 胞壁及细胞膜的通透性大，阴性菌染成的紫色可被 酒精脱掉后复染成红色. 微免教研室 西安医学院 病原生物学与免疫学教研室 一、细菌的形态结构观察 二、细菌涂抹标本片的制作及革兰染色法 三、油镜的使用与保护 思考讨论 油镜头有哪些标志?如何正确使用油镜头？ 革兰染色法最关键的步骤是哪一步？如果这一步掌握不好会对染色结果有何影响？ 革兰染色法的结果怎样判断？有何实际意义？ 实验报告 1、绘图： 葡萄球菌、肠道杆菌、霍乱弧菌、 破伤风梭菌芽胞、伤寒杆菌鞭毛、 肺炎链球菌荚膜。 2、记录并分析革兰染色结果。 基本形态（示教） 一、细菌的基本形态和特殊结构 葡萄球菌 肠道杆菌 霍乱弧菌 特殊结构（示教） 一、细菌的基本形态和特殊结构 伤寒沙门菌的鞭毛 破伤风梭菌的芽胞 肺炎链球菌的荚膜 材料 二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法 涂片、干燥、固定 结晶紫 初染(1分钟、水洗) 碘液 媒染(1分钟、水洗) 95%乙醇 脱色(30秒、水洗) 稀释复红 复染(1分钟、水洗擦干) 低倍镜对光、寻找细菌，油镜观察 紫色——G+菌，红色——G-菌 二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法 细菌涂抹标本制作 革兰染色法 镜检 结果 油镜头的使用原理 空 气 折光率1.000 香柏油 折光率1.515 玻 璃 折光率1.520 微免教研室