水的微生物限度检查标准操作规程.docVIP

1. 主题内容 为了保证微生物限度检查法的正确操作，特制订本文件。 2. 适用范围 适用于微生物限度检查法的操作。 3. 责 任 QC负责起草，QC主管负责审核，质量部长负责批准。 QC人员负责本文件的执行。 4. 内 容 4.1. 简述 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。细菌、霉菌和酵母菌计数除另有规定外均采用平板菌落计数法，这是活菌计数的方法之一。4.2. 设备要求 4.2.1. 微生物限度检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统，应在洁净度100级的单向流空气区域内进行，其环境的洁净度为10000级。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。 4.2.2. 阳性菌试验应另设单独的净化工作台，不得在供试品检验用的无菌室内或净化工作台上操作。4.4. 试验准备 4.4.1. 将供试品及所有已灭菌的玻璃器皿经传递窗移至无菌室内。编号后将全部外包装（牛皮纸）去掉。 4.4.2. 开启紫外杀菌灯后，操作人员用肥皂洗手，进入缓冲间，换工作鞋。再用消毒液洗手或用乙醇棉球擦手，穿戴无菌衣、帽、口罩、手套。 4.4.3. 操作前先用乙醇棉球擦手，再用碘状棉球（也可用乙醇棉球）擦试供试品瓶的开口处周围，待干后启封。 4.. 细菌、霉菌计数℃培养箱中培养48h。霉菌计数平板倒置于20～25℃培养箱中培养72h。 4.5.5.2. 除另有规定外，细菌培养48小时，分别在24及48小时点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌培养72小时，分别在48及72小时点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至5～7天进行菌落计数。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。若平板上有2个或2个以上菌落重叠，肉眼可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数；若平板生长有链状或片状、云雾状菌落，菌落间无明显界限时，一条链，片作为一个菌落计，但若链、片上出现性状与链（片）状菌落不同的可辨菌落时，仍应分别计数，若生长蔓延的较大的片状菌落或花斑样菌落，其外缘有若干性状相似的单个菌落，一般不宜作为计数用。 4..4. 一般营养琼脂培养基用于细菌计数；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌计数。在特殊情况下，若营养琼脂培养基上长有霉菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌，则应分别点计霉菌、细菌菌落数。然后将营养琼脂培养基上的霉菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数，与玫瑰红钠琼脂培养基中的霉菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较，以菌落数高的培养基中的菌数为计数结果。