副猪嗜血杆菌的分离鉴定和防控措施(恢复)(恢复)精讲.docxVIP

分类号：学校代码：UDC：研究生学号：密级：硕士专业学位论文副猪嗜血杆菌病分离鉴定和防治措施学 位 申 请 人： 柏建东 指 导 教 师：副教授 合 作 教 师： 研究员 专业学位类别： 兽医硕士 专业学位领域：2015年4月论文题目：副猪嗜血杆菌病分离鉴定及防治措施 专业：兽医硕士研究生： 柏建东 指导教师：副教授 摘要副猪嗜血杆菌病,其英文名字是（Haemophilusparasuis，HPs），由副猪嗜血杆菌引起的重要的细菌性传染病，导致保育仔猪产生多发性浆膜炎与关节炎，使养殖业蒙受巨大的财产损失。为探索出其有效的防治措施，本研究利用临床诊断、病理解剖以及实验室诊断等方法，从几例临床症状、病例剖检疑似为副猪嗜血杆菌病猪体内分离到革兰氏阴性可疑菌，然后进行镜检、生化试验、基因测序等手段确定其为副猪嗜血杆菌。但由于副猪嗜血杆菌体外培养条件严格，生长繁殖受到抑制，严重影响了疫苗的大量生产。为了探索副猪嗜血杆菌培养的液体条件，本试验通过副猪嗜血杆菌的优化培养，确定该菌的最适培养条件为胰蛋白胨15.0 g ,大豆蛋白胨5.0 g、氯化钠5.0 g、葡萄糖2.5 g、钙离子0.04-0.06 %、磷离子0.02-0.03 %、灭菌蒸馏水1000 mL, pH 7.2-7.4时在5 %的CO2厌氧培养箱中培养16h。通过药敏试验，筛选出对该猪场的患病仔猪具有针对性的敏感药物，并通过对该菌的生物学特性、毒力、遗传特征、免疫原性进行检测，发现该菌株符合作为灭活疫苗的特征。并通过AlCl3作为佐剂来制备副猪嗜血杆菌自家灭活苗，最终结果显示物理性状符合AlCl3疫苗的特征，安全性好，免疫原性强，对断奶之后至保育阶段的仔猪有良好的保护性。关键词：副猪嗜血杆菌，分离鉴定药敏试验疫苗论文类型：其他AbstractHaemophilus parasuis disease, whose name is HPs, caused by the H. parasuis important bacterial diseases, resulting in nursery pigs produce multiple serositis and arthritis that suffered huge aquaculture damage to property. In order to explore its effective control measures, this study, clinical diagnosis, and anatomic pathology laboratory diagnostic methods, clinical symptoms from a few cases, suspected cases of necropsy Haemophilus parasuis isolated Gram-negative pigs in vivo to suspicious bacteria and microscopic examination, biochemical tests, gene sequencing and other means identified as Haemophilus parasuis. However, due to H. parasuis strict conditions in vitro, inhibited growth and reproduction, seriously affecting the mass production of the vaccine. In order to explore the conditions parasuis liquid culture, the test by optimizing the culture of H. parasuis, determine the optimal culture conditions for the bacteria tryptone 15.0 g, soy peptone 5.0 g, sodium chloride, 5.0 g, glucose 2.5 g, 0.04-0.06% calcium, 0.02-0.03% phosphorus ions, sterile distilled water 1000 mL, pH 7.2-7.4 16h incubation in a 5% CO2 incubator anaerobic. By susceptibility