马铃薯脱毒与脱毒种薯繁殖技术.docVIP

马铃薯脱毒与脱毒种薯繁殖技术 马铃薯脱毒与脱毒种薯繁殖技术 病毒是引起马铃薯“退化”的主要原因。由于马铃薯是无性繁殖作物，病毒侵染进植株体内后，会逐代传递并积累，最终导致种性退化而大幅度减产。解决这一问题的有效办法，是采用生物技术脱除已侵染到块茎中的病毒，使之恢复原有品种的生长特性。 （一）脱毒马铃薯的增产效果及特点 1.增产效果 而同样的品种，经过脱毒和隔离繁殖后，植株生长健壮，产量显著增加，比脱毒前至少增产30%~50%，甚至成倍增产。退化越严重，脱毒后增产效果越明显。 2.增产的原因 脱毒后的马铃薯，摆脱了病毒对植株机体各种生理活动的干扰，使植株生长旺盛，从而恢复了该品种原有的生长发育特性，也恢复了其增产潜力。据测定，脱毒马铃薯植株叶绿素含量比退化株增加 33.4 %，光合生产率提高14%-41.9%，植株高度增加50%以上。 3.脱毒马铃薯的特点 脱毒马铃薯只是脱除了已经侵染进植株体内的病毒，但不能避免病毒的再侵染。换句话说，脱毒马铃薯在繁殖和生产过程中仍会遭到各种病毒的再侵染而重新退化。因此，在脱毒后的整个繁殖过程中都应采取有效措施防止或延缓病毒的再侵染。否则，将失去脱毒意义。另外，不能利用脱毒商品薯作种子，因为商品薯在生产过程中已经感染了病毒。这就是说，脱毒马铃薯是有“有效期”的，过了有效期就应淘汰。繁殖、生产代数越高，再退化的就越严重。 （二）脱毒技术 目前采用最多的是“茎尖培养”脱毒技术。 1.茎尖剥离方法 将经消毒处理的幼苗材料置于解剖镜的承物台上，在40倍的目镜下左手拿镊子夹住植株，右手用解剖针由外向里逐层将植株生长点的小叶片和叶原基剥离掉，最后只保留带一个叶原基的生长点，大小约为0.1~0.2mm。用解剖针把生长点“切”下置于培养基上，封严瓶口放于培养室内培养。 2.茎尖培养方法 采用MS基本培养基，每升添加6-BA 2mg, NAA 0.5mg，甘氨酸 2mg，盐酸硫胺素0.4mg，盐酸吡哆素0.5mg，烟酸0.5mg，肌醇100mg，生物素0.05mg。茎尖培养条件是，温度23~25℃，光照强度3000~4000勒克斯，光照时间为每天16小时左右。在正常条件下，经过30~40天的培养可见到茎尖有明显的增长。大约3~4个月后就能长成小植株。 3.病毒检测 病毒检测的目的，是鉴定所获得的试管苗是否完全脱除所有病毒。 病毒检测方法有两种。一种是生物学方法，一种是血清学方法。目前血清学方法应用普遍的是 “酶联免疫吸附技术（ELISA）”。由于试剂盒上都有详细说明，在此不作详细介绍。 （三）脱毒试管苗快繁技术 1.脱毒基础苗保存技术 经病毒检测获得不带任何病毒的试管苗后，首先在试管内进行扩繁。达到一定数量以后，将其中一部分进行大量扩繁用于微型薯生产，另一部分继续保存。保留的这部分试管苗就是基础苗。在下一个切繁季节，取出其中的一部分进行扩繁，另一部分仍然保存。 所保留的基础苗应每隔一段时间进行切段继繁。基础苗的培养条件为10～15℃、16小时光照、3000勒克斯光照强度。较低的培养温度可延缓植株生长，减少继繁次数。 2.试管苗快繁技术 试管苗快速繁殖是脱毒马铃薯种薯繁殖的第一步，只有繁殖出足够的试管苗，才能保证繁殖出足够的脱毒微型薯。试管苗快繁，可采用固体培养基，也可采用液体培养基。试管苗快繁步骤如下： (1)准备培养基 培养基成分是Ms大量元素、微量元素、铁盐、20克／升蔗糖（可用普通白糖代替），pH值5.6，不加有机物和植物激素。 (2)茎节切段繁殖方法 茎节切段繁殖，是在无菌条件下将保存的基础试管苗，按茎节切段置于新的培养基上进行培养。每个三角瓶内培养10～15个节段（罐头瓶可培养30～50个）。 培养温度23～25℃，光照强度3000勒克斯，光照时间16小时/天。液体培养15～20天就可移栽。 （四）脱毒微型薯工厂化生产技术 脱毒微型薯又叫脱毒原原种，要求在无病毒传播源的条件下进行工厂化生产。生产微型薯的首要条件，是防止病毒的再侵染。病毒传播的主要媒介是蚜虫，所以在繁殖原原种时，必须在严格隔离蚜虫的条件下进行。生产微型薯的方法有两种。一种是栽植基础苗剪顶芽扦插，另一种是直接定植试管苗。两种方法各有优缺点。 1.剪顶芽扦插繁殖技术 （1）培养基础苗 基础苗是指试管苗移栽到育苗盘中，长到一定大小后作剪顶、腋芽扦插用的。利用基础苗剪顶、腋芽扦插，可大大提高试管苗的利用率，降低培养成本。其方法如下。 首先应用1％的磷酸二氢钾和0.5%的尿素溶液将蛭石拌湿，使之达到用手握能成球，放下后能松散即可。然后装育苗盘，装至盘的2／3深，将盘面刮平。按7～8厘米行距，5厘米株距定植试管苗。 基础苗栽好后，将育苗盘摆放于铺有草炭(约3厘米厚)的培养架上。如果温室内温度高、光照强，栽苗后应适当遮荫，防止试管苗萎蔫。一般栽苗后的