5N同位素示踪技术在动物蛋白质代谢研究方法中的应用2.docVIP

5N同位素示踪技术在动物蛋白质代谢研究方法中的应用 ?? 原子核中具有相同质子数（中子数不同）的一类核素，由于它们在元素周期表中的位置相同，故称为同位素。自1896年发现天然放射性起，核技术的应用已逾100年。作为一种技术同位素示踪得到广泛的应用，尤其对生物领域研究与发展起到了重要作用，被人们称为“流动型原子显微镜”（商照荣，1995）。同位素示踪技术由于其很高的灵敏度和准确性，因此在农业中的应用极为广泛。国外起步于上个世纪初，1924年，Geogede Hevesy第一次将放射性物质应用于动物研究，直到50年代才被广泛应用。我国始于1956年，近半个世纪以来，得到了迅速发展，在研究深度和广度上也有了较大提高，应用的核素达40多种，同位素标记化合物达140多种。 ??? 根据同位素示踪所标记核素的稳定性和放射性，分为稳定性同位素示综，如15N、13C等和放射性同位责承综，如3H、14C、32P等。其在农业中的应用领域主要是土壤肥料、植物生理、植物营养、生物固氮、生态环境、植物保护、动物生理、动物营养、畜牧兽医、医学及人的营养等方面。作为一种先进的研究工具，解决了许多在基础理论和实际应用方面难以解决的问题，促进了相关学科的发展。 ??? 稳定同位素15N目前在农业上应用最多的领域是土壤肥料、植物营养代谢、生物固氮等。??? 通过15N示踪方法，研究了作物对氮肥的吸收、运转和代谢规律，为合理施肥，提高肥料利用率提供了科学依据。但15N作为一种先进的工具应用于动物营养研究，特别是在蛋白质代谢方面，仅有少量报道，远没有发挥其应有的作用。近些年来，畜牧业发达国家一直在修订和改进动物饲养标准，这需要大量的代谢研究做基础，而研究方法的先进性直接影响着试验结果的准确性、真实性和可靠性。在蛋白质的代谢研究中，无论是非蛋白氮还是蛋白氮，目前沿用的仍是传统的研究方法。与15N示踪技术相比，存在很多局限性，因此，利用15N示踪技术研究蛋白质的代谢规律，将对动物营养研究产生深远的影响。 1同位素示踪的优缺点 1．l优点 1．1．l灵敏度高。对于放射性同位素，其检出限量为10-15g。而常规的仪器分析最高也只能达到10-12g，因此在动物营养衡量元素、维生素等的代谢研究中具有无可比拟的优越性。 1．1．2? 可区分体系中原有和加入的核素，利用同位素具有的放射性（放射性同位素）或不同于天然丰度（稳定性同位素）的特性进行分离。 1．1．3可在机体正常的生理条件下进行。由于标记核素的示踪性，试验过程无须特殊处理。 1．1．4简化操作程序。对于样品的测定，一般无须进行分离，仅测定其放射性或丰度即可。 1．1．5试验结果准确。对于动物营养研究，内源性的影响很难排除，而同位素示踪可大部分或全部排除其干扰。 1．2缺点 1．2．1同位素效应。一般在应用时认为同位素间具有相同的化学性质，实际上同位素之间存在物理或放射化学性质的差异，即同位素效应。对于生物学研究，相对来说，这种差异所引起的误差远小于试验的系统误差，可忽略不计。 1．2．2放射生物学效应。对于放射性同位素，其射线会引起试验对象的生理生化变化，有些同位素还会衰变为其他元素，造成不可预测的影响。 1．2．3放射性污染。射线具有较强的穿透能力，对试验人员造成伤害，代谢产物也会带有放射性，因此，对试验设计剂量和防护要求较高。 2．2．4应用范围限制。并不是所有的元素都适用于做标记物。 1．2．5成本高。同位素价格及所需测定仪器比较昂贵，另外，还是必要的防护。 2稳定同位素示除与放射同位素示踪的比较 ??? 由于稳定同位素和放射同位素核素性质的不同，对其利用的方式也不同，导致二者有所差异，优缺点见表1。 表1稳定同位素示踪和放射同位素示踪的比较 ? 稳定同位素元素 放射同位素示踪 所利用的特性 同位素质量差异 射线 灵敏度 同常规 高 成本 高 高 安全性 安全 不安全 污染 无 有 同位素效应 低 高 3同位素示踪技术在动物营养中的应用现状 ??? 从目前已掌握的资料看，动物营养研究领域所使用的同位素绝大多数是放射性同位素，主要用于研究矿质元素在动物体内的吸收、转移和代谢规律。所使用的核素包括钙、磷、铁、锌、钠、钾、锰、铝、钴、铜、碘、碳、氢等，所涉及的动物包括单胃和反刍动物。如Aruna等（1992）用65Zn研究了山羊日粮中锰含量对锌吸收串的影响；陈颂华等（1991）利用65研究了Zn在黄鳝血液及主要器官中的分布和代谢；陈堆松等（1991）利用55+59Fe研究了蛋氨酸铁饲喂妊母治后向仔猪体内的转移；楼洪章等（1991）利用32P研究了玉米螟精子的转移；Gislason等（1992）用59Fe研究了仔猪补铁的吸收利用；王中华等（2000）应用14C标记的丙酸和葡萄糖研究了不同瘤胃乙、丙