消毒与灭菌概论.pptVIP

第四章 消毒与灭菌技术 教学情境： 医院消毒水气味 注射前皮肤消毒 晒被子 熏蒸食醋预防感冒 等生活经历 第四章 消毒与灭菌技术 P19 灭菌：利用物理和化学方法杀灭或除去物料及设备中所有微生物的过程，包括繁殖体和芽孢。 消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、环境中的一切病原微生物，一般只能杀死营养细胞而不能杀死芽孢。 消毒不一定能达到杀菌的要求，而灭菌能达到消毒的要求。 思考：消毒与灭菌的概念及区别 第一节 化学灭菌方法P19 原理：某些化学药剂能与微生物细胞物质发生反应而具有杀菌作用。如甲醛、氯（或次氯酸钠）、高锰酸钾、环氧乙烷、季铵盐（如新洁尔灭）等。 适用范围：化学药剂适于接种室、培养室等环境的灭菌，接种操作前小型器具的灭菌等。 化学药品的灭菌使用方法，根据灭菌对象的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态熏蒸等。 1醇：70-75％酒精溶液 75％酒精溶液的杀菌作用在于使细胞脱水，引起蛋白质凝固变性。对营养细胞、病毒、霉菌孢子均有杀死作用，但对细菌的芽孢杀死作用较差。常用于皮肤和器具表面杀菌。苯氧乙醇2%水溶液 2酸： 乳酸（丙醇酸、乙羟基丙酸)，乙酸，过氧乙酸 过氧乙酸是强氧化剂，它是广谱、高效、速效的化学杀菌剂，对营养细胞、细菌芽孢、真菌孢子和病毒都有杀灭作用。 3碱：石灰水 （熟石灰的水溶液） 4酚类：苯酚（石炭酸、C6H6O）毒性较大，易污染环境，且水溶性差，使应用受到限制，而酚类衍生物的使用，扩大了作为消毒剂的使用范围。来苏儿（甲酚皂溶液） 5醛：甲醛 甲醛(HCHO)是强还原剂，它能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质变性，对氨基和蛋白质的变性有较强活性，这是用甲醛作为灭菌剂的根据。使用时可以以2份37％甲醛溶液与1份KMnO4混合，或者将37％甲醛溶液直接加热，产生气态甲醛用于灭菌。甲醛灭菌的缺点是穿透力差。 福尔马林（甲醛30-40%水溶液） 戊二醛 在酸性条件下，不具有杀死芽孢的能力，只有在碱性条件下，才具有杀死芽孢的能力，常用2％的溶液，常用于器具、仪器和工具等灭菌。 6氧化剂： 高锰酸钾 高锰酸钾溶液的灭菌作用是使蛋白质、氨基酸氧化，使微生物死亡，一般用0.1％～0.25％的溶液。 氯气 Cl2+H2O HClO+HCl 次氯酸 盐酸 过氧化氢，环氧乙烷，漂白粉（含氯消毒剂）， 漂白粉：（次氯酸钠、氯化钙、氢氧化钠的混合物） 漂白粉的化学名称是次氯酸盐(次氯酸钠，NaOCl)，它是强氧化剂，也是廉价易得的灭菌剂。它的杀菌作用是次氯酸钠分解为次亚氯酸，后者不稳定，在水溶液中分解为新生态氧和氯，使细菌受强烈氧化作用而导致死亡，对杀死细菌和噬菌体均有效。 臭氧：原理（常温常压下）O3=O2+O(单个氧原子）。特点：不存在任何有毒残留物，称为无污染消毒剂。适用：环境消毒 去垢剂：新洁尔灭 （苯扎溴铵、溴化苄烷铵） 新洁尔灭是表面活性剂类洁净消毒剂。它在水溶液中以阳离子形式与菌体表面结合，引起菌体外膜损伤和蛋白变性。10 min能杀死营养细胞，但对细菌芽孢几乎没有杀灭作用。一般用于器具和生产环境的消毒，不能与合成洗涤剂合用，不能接触铝制品。 第二节 物理灭菌的方法P13 （一）干热灭菌法 进行干热灭菌时，微生物细胞发生氧化，微生物体内蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒等作用，其中氧化作用导致微生物死亡是主要依据。 由于微生物对干热的耐受力比对湿热强得多，故干热灭菌所需的温度要高，时间要长，一般160～170 ℃，1～1.5 h。 实际应用时，对一些要求保持干燥的实验器具和材料可以采用干热灭菌法 （一）干热灭菌法 是一种极端的手段，温度高、时间长。 原理：氧化作用是干热灭菌的主要根据。 160-170℃持续2h或170-180℃持续1h； 180℃45min, 180℃持续2h或250℃45min； 140℃持续3h； 160℃保温1 h。自然降温至60℃才能开启箱门取出材料。 主要针对必须保持干燥的实验器具或材料（培养皿、接种针、固定化细胞用的载体材料等）。 （二）火焰灭菌法 利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称为火焰灭菌法。该法方法对设备要求低，操作简单，灭菌彻底，但使用范围有限，仅适用于接种针、玻璃棒、三角瓶口等的灭菌。 （三） 湿热灭菌技术P11 湿热蒸汽比干热空气穿透力大，易使菌体蛋白变性而使微生物死亡。利用饱和蒸汽进行灭菌的方法称为湿热灭菌法。 1流通蒸汽法。只能杀死营养体而不能杀死芽孢 2间歇蒸汽灭菌法。适用于不耐高温的物品，可达到完全灭菌的目的。 3高压蒸汽灭菌法。彻底迅速的灭菌方法，最常用。 （三） 湿热灭菌技术P11 1流