上海交通大学微生物实验课件实验八质粒提取概要.ppt

实验报告 实验目的 实验原理 实验步骤 结果与分析 思考题 p106(1),(2), (4) 下次实验 质粒DNA的电泳、病毒的检测（血凝和血凝抑制试验） 实验八 质粒提取、病毒培养 实验目的 理解碱裂解法制备质粒DNA的原理 掌握提取质粒DNA的方法 掌握DNA琼脂糖凝胶电泳的原理 掌握DNA电泳操作及DNA分子量大小的测定 一、质粒的一般生物学特性 质粒(plasmid)是独立于细菌染色体以外的能自我复制的环状闭合的双股DNA，质粒DNA一般为细菌染色体的3%左右, 作为基因克隆质粒载体的所有质粒DNA分子都必定包括如下三个共同的组成部分: 复制基因、选择标志基因和克隆位点。 质粒广泛存在于细菌细胞中, 此外在霉菌、蓝藻、酵母和某些动植物细胞中也发现有质粒存在。 大肠杆菌乳糖操纵子简介： I: 调节基因 P: 启动子 O: 操纵基因 Z、Y、A: 结构基因, 其中Z编码 β-半乳糖甘酶( β-galactosidase), Y 编码透性酶 ( permease) , A 编码乙酰基转移酶( acetylase). I P O Z Y A Ori:复制子． ＭＣＳ：multiple cloning sites,多克隆位点． 二、碱裂解法制备质粒DNA注意点：