PCE-DGGE檢测饲料中的激素对渔池微生物多态性的影响.docVIP

PCE-DGGE 檢測飼料中的激素對漁池微生物多態性的影響 张仲彬 张鸿业 理学院 2007生物技术 现代人工养殖渔业越趋发达,而大部分养殖场用的饲料都人工加入了雌激素等可以增加鱼类肉质的激素类药物,而激素可能对池塘土壤中的微生物造成不良影响, 微生物是自然界的分解者, 而鱼群的排泄物更需要微生物来分解,如果渔池土壤中的微生物种类和数量大幅度减少, 会导致排泄物过多造成磷污染,做池水富营养化, 藻类过份生长做鱼群生存环境受到影响, 更甚者做成恶性循环,使该池永久不适合鱼类生长. 本实验就是通过PCR-DGGE变性梯度凝胶电泳技术对环境相近的天然和人工渔池进行土壤微生物多态性的比较, 从而反影饲料对微生物的影响,指导改善饲料的制作工艺. 分子生物学技术方法如PCR2DGGE[4 ] , PCR2SSCP[5 ]和PCR2RFL P[6 ]使得研究者能够在分子水平上对土壤微生物多样性进行研究。本研究采用的变性梯度凝胶电泳(DGGE) 技术以土壤微生物群体的基因组DNA 为研究对象, 通过比较不同土壤中各种微生物的16S rRNA 基因信息来了解微生物的多样性。具体研究思路如下: 从土壤样品中直接提取出土壤微生物群体的基因组DNA, 选择对大多数细菌的16S rRNA基因V3 区能有效扩增的引物进行特异性的PCR扩增,然后对PCR产物运用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术