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网址： HYPERLINK 第 PAGE 1 页，共 NUMPAGES 1 页 人乳头瘤病毒18型E6E7反义RNA表达重组体的构建 人乳头瘤病毒18型E6E7反义RNA表达重组体的构建 中华皮肤科杂志 1998年第3期第31卷 论著 作者：郭庆　曾凡钦　吕凌　王斌 单位：510120 广州，中山医科大学孙逸仙纪念医院皮 肤科(郭庆　曾凡钦)；分子医学研究中心［吕凌(指导者)　王斌(指导者)］ 关键词：HPV18E6E7；逆转录病毒载体；反义RNA 　【摘要】　目的　为了探讨人乳头瘤病毒(HPV)的致 病机理和寻找由HPV所致疾病的治疗途径，研究了HPV18型E6E7反义RNA表达重组体的构建。方法　以HPV18型全基因质粒为模板，聚合酶链反应扩增出HPV18 型E6E7区816bp片段，以逆转录病毒pLNSX为载体，构建HPV18型E6E7逆转录病毒重组体，并 以限制性内切酶酶切和Southern杂交分别鉴定插入方向和特异性检测。　结果和结论　筛选出可表达HPV18型E6E7逆转录病毒重组体。该反义RNA表达重组体的构建为进一步研究E6E7基因的作用，以及探索是否能通过反义技术调控E6E7基因的表达打下基础。 Construction of Human Papillomavirus Type 18 E6E7 Antisens e RNA Expres sing RecombinantsGuo Qing,Zeng Fanqin,Lu Ling,et al.　Depart ment of Dermatology,Memori al Hospital of Sun Yat-Sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510120 【Abstract】　Objective　In order to study the pathogenesis of h uman papillomavi rus(HPV) and seek for a therapeutic approach of the diseases caused by HPV, th e construction of HPV18 E6E7 antisense RNA expressing recombinants was studied.Meth ods　We amplified the HPV18 E6E7 816bp by PCR with HPV18 plasmid DNA as the temp late. pLNSX retroviruses were used as vectors,the HPV18 E6E7 retrovirus recombi n ants were constructed. And then the recombinants were cleaved with restriction e ndonuclease and hybridized with Southern blot for identifying the inserting dire ction and speci al check respectively. Results and conclusion　The HPV18 E6E7 an tisense RNA-retrovirus expres sing recombinants were screened and obtained,which had laid the foundation of st udying the function of E6E7 genes further and explore whether the antisense te chnique can adjust and control the expression of E6E7 genes. 【Key words】　HPV18E6E7Retrovirus vectorAntisense RNA[ HJ 人乳头瘤病毒(HPV)是与性传播疾病和生殖器肿瘤密切相关的小DNA病毒。由H PV引起的肛周、生殖器疣的发病率近年来急剧上升，且治疗困难，复发率高；现已证明某些类型的HPV与生殖器肿瘤关系密切［1］。因此，如何控制HPV感染是 当今研究的热点之一。近几年以反义技术研究和调控基因的表达［2，3］，已开辟了基因治疗的新领域，并已取得一些进展［4］。 本实验利用聚合酶链反应(PCR)技术，扩增了HPV18型E6E7基因，并成功地构建了可表达HPV1 8型E6E7反