重金屬对贝类毒性效应的研究进展.docVIP

重金属对贝类毒性效应的研究进展 摘要 本次研究重金属对贝类毒性效应，其中包括镉和汞对贝类的毒性效应。研究表明，镉对贝类重金属镉能够诱导SOD、CAT、GSH-PX三种氧化酶的活性上升,而胁迫时间超过一定范围后,三种酶活性均会逐下降。在研究镉对贝类的毒性影响时，主要着重抗氧化酶系活性的影响和免疫功能的探索。探明了金属硫蛋白、超氧化物歧化酶和溶菌酶基因的表达对 Cd、Hg、弧菌复合胁迫的响应情况；检测了 Cd、Hg 导致的血细胞损伤，初步阐明了四角蛤蜊对 Cd、Hg 胁迫的响应机制。 关键词 重金属 抗氧化酶系统 胁迫 免疫 Abstract The study on the toxic effect of heavy metal in shellfish, including the toxic effects of cadmium and mercury on shellfish. Research shows that the rise of shellfish, cadmium cadmium can induce SOD, CAT, GSH-PX three kinds of enzyme activity, and the stress time exceeds a certain range, three kinds of enzyme activity will decline. In the study of effects of cadmium on shellfish toxicity, explore the effects and immune function is mainly the activity of antioxidant enzymes. Proven metallothionein, superoxide and lysozyme gene expression in response to Cd, Hg, Vibrio composite stress; detection of blood cell injury, caused by Hg Cd, the response mechanism of four to Cd, clam Hg stress. Keywords Heavy metal Antioxidant enzyme system Coercion Immune 1.镉对贝类毒性效应的研究进展 1.1镉胁迫对贝类抗氧化酶系活性的影响 取经重金属镉胁迫实验后的青蛤血清,用于超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性测定。 1.1.1过氧化氢酶 过氧化氢酶(CAT)活性采用钼酸铵中止法,以每毫升血清或每毫克组织蛋白每秒钟分解1μmol的H202的量为一个活力单位。 1.1.2超氧化物歧化酶 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定原理为:通过使用黄嘌呤/黄嘌吟氧化酶体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团,发色基团可被由上述体系产生的氧化物阴离子还原成为水溶性的黄色甲染料,这样SOD活性通过抑制发生基团的还原来测定。在本反应体系中SOD抑制率达50%时所对应的酶量为一个SOD活力单位。 1.1. 受到镉胁迫后,青蛤血清和肝脏中的抗氧化酶SOD、 CAT和GPx 的活性可在短期内达到峰值,这表明Cd在青蛤体内富集能对机体造成氧化压力,同时有大量活性氧产物的产生,这种刺激能使青蛤体内迅速合成抗氧化酶,来进行清除和转运活性氧产物。之后随着暴露时间的延长,抗氧化酶系活力整体逐渐下降,即青蛤清除活性氧、抵御外环境损伤的能力降低。在个别时间点,实验组酶活力显著低于对照组,表明此时抗氧化酶活力受到了抑制。贝类处于对逆境胁迫具有高易感性的不稳定状态,此时机体的免疫系统遭到破坏而易于遭受来自外界的病害。 1.1.4谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)可以催化GSH产生GSSG,而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH,通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。规定为每0.1ml血清在37°C反应5分钟,或者每毫克蛋白质,每分钟扣除非酶反应的作用,使反应体系中GSH浓度降低lumol/L为一个酶活力单位。 1.2镉胁迫对贝类免疫活性的影响 1.2.1 软体动物具有体液免疫和细胞免疫功能，体液免疫系统由溶酶体酶，凝集素和抗菌肽等组成。细胞免疫在贝类免疫过程中起着主要作用. 血细胞的吞噬作用是整个防御系统最主要的过程，由识别，粘连，摄取，破坏和清除外源细胞等不同阶段组成。贝类血细胞在营养物质的转运，伤口修复，去除代谢产物或污染物等方面起着重要作用。贝类血细胞可以细分为两种主要类型：透明细胞和颗粒细胞。颗粒