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基因工程原理与技术试题 基因工程原理与技术 1 绪论—基因工程概况 一、 基因工程含义 进行严密设计，通过体外DNA重组和转基因等技术将外源基因导入受体细胞，有目的地改造生物，短时内创造出更完善的新的生物类型。 广义上指产业化设计与应用，包括上、下游技术两大部分，倾向于工程学范畴。 优点：打破了常规的物种间界限（原核与真核生物之间、动植物之间、甚至人与其他生物之间），使遗传信息进行重组和转移。 三、 基因工程的基本技术路线 四、 基因工程研究发展史 ①准备阶段。 1944年美国Avery等细菌转化证明DNA是基因载体。 1953年Watson和CrickDNA双螺旋模型。 1958～1971年先后确立中心法则,破译64种密码子，揭 示了遗传信息的流向和表达。 20世纪60年代末70年代初：发现限制性核酸内切酶和 DNA连接酶，实现DNA体外切割和连接。 1972年首次构建出重组DNA分子。 五、基因工程研究内容 基础研究 1、克隆载体： 原核生物的克隆载体： Ti质粒及其衍生载体（植物基因工程）， 动物病毒克隆载体（动物基因工程）。 核心环节： 构建新载体（适于高等动植物转基因表达载体和定位整合载体），应大力发展。 3、目的基因 ： 　　开发人们特殊需要的基因，即目的基因（优良性状的基因、致病基因）。发达国家激烈竞争的焦点，有限的战略性资源，可申请新基因专利。 　　获取途径 ：构建基因组文库或cDNA文库； PCR直接从某生物基因组扩增；较小的可人工化学合成 。 　已获目的基因大致种类：与医药相关的基因；抗病、虫害和恶劣环境的基因；编码特殊营养价值的蛋白或多肽基因。 　　某种生物基因组的全部基因：1990年开始实施“人类基因组计划”，2000年6月已绘制“工作框架图”。 意义：人生长、发育、繁殖 ，遗传性疾病的病因（基因治疗），优生优育。 “水稻基因组计划”：中国水稻（籼稻）基因组“工作框架图”和数据库已完成。中、英两国合作 “家猪基因组计划”。 5、新技术： 　　 一系列用于不同类型受体细胞的DNA转化方法和病毒转导方法：基因枪、电激仪等克服了某些克隆载体应用的物种局限性，提高外源DNA转化的效率。 基因的检测技术：放射性同位素标记探针，非放射性标记DNA探针和荧光探针技术。 　　基因分离技术：凝胶电泳可分开几万碱基的DNA分子或DNA片段；脉冲电泳能分开上百万碱基的DNA分子或片段或完整的染色体。 转基因植物 ：三类 ①农杆菌介导的基因转移。 ②直接基因转移：以原生质体或细胞为受体。如用PEG、电激仪、基因枪、脂质体等将基因导入细胞或原生质体，培养成转基因植株。 ③种质系统的基因转移。如利用子房注射，花粉管通导等方法导入外源基因。 抗病毒、细菌和真菌病，抗虫，抗除草剂，抗旱、抗寒、抗热和抗盐，改善植物品质，获得能生产疫苗或活性多肽药物的植物。 六、基因工程研究发展前景 传统的生产方式和产业结构: 　　决策者的战略： 竞相拟定宏伟研究发展计划，争取主动权，巨资开发。 　 一大批高学历的科技工作者参与： 重点开展 基因组学、基因工程药物、 动植物生物反应器和环保等方面。 　　 人类生活质量全面改善 * * （共5道题，每题20分，总分100分） 1.什么叫基因工程？基因工程有什么意义或价值？ 2.什么是工具酶？试列举4种工具酶的名称及其用途？ 3.什么是基因工程载体？试列举2种基因工程载体名称及 其用途？ 4.如何获得目的基因？试列举2种常用方法？ 5.试述PCR的基本原理及该方法的重要意义？ 如何理解基因工程？有哪些理论依据？怎样达到目的？ 二、 基因工程理论依据 ①基因有共同的物质基础： 有遗传功能的特定核酸序列：DNA片段或RNA。 ②基因可切割： 存在间隔序列（重叠序列的基因也可切出）。 ③基因可转移： 可在染色体DNA或不同染色体之间跳跃，基因组也可重组。 ④多肽与基因之间存在对应关系。 一种多肽对应一种基因。根据表达产物的性质可检查基因的转移或重组。 ⑤遗传密码通用。 三联密码子（少数除外）与氨基酸相对应，所有生物都相同，只要具备转录翻译条件均能转译出原样的氨基酸。基因可人工合成。 ⑥基因可复制传递遗传信息。 重组基因可传代，获得相对稳定的转基因生物。 ②基因工程问世。 1973年首次完成重组质粒DNA对大肠杆菌的转化，