河南工业大学生物化学考研第01章绪论第02章蛋白质的构件----氨基酸摘要.ppt

 第二章  蛋白质的构件----氨基酸 1.2 蛋白质的分类 三、按功能分类 p72 1. 酶类 2. 调节蛋白 3. 转运蛋白 4.贮存蛋白 5. 收缩和游动蛋白 6. 结构蛋白 7.支架蛋白(SH2组件) 8. 保护和开发蛋白 2.1 氨基酸的种类与结构 含有氨基的羧酸 (一)、 化学结构 R-CH(NH2)-COOH R 代 表 氨 基 酸 之 间 相 异 的 部 分 ， 叫 R 基 (R group)， 又 称 为 侧 链 (sidechain) 。 无色晶体、溶于水 地 球 上 天 然 形 成 的 氨 基 酸 有 300 种 以 上 ， 但 是 构 成 蛋 白 质 的 氨 基 酸 只 有 20 种 , 且都是α-氨基酸（可能还存在更多的）。 提问：什么是α-氨基酸？ 答案： ----C-C-C-C-COOH γ β α ----C-C-C-C(NH2)-COOH α-氨基酸 ----C-C-C (NH2)- C - COOH β-氨基酸 ----C-C (NH2)- C - C - COOH γ-氨基酸 2.1.5、蛋白质氨基酸的分类 按侧链(-R)的性质，常见的蛋白质氨基酸被分为四类： 1. 非极性R基氨基酸（共8种）： 丙氨酸(Ala) 缬氨酸(Val) 亮氨酸(Leu) 异亮氨酸(Ile) 脯氨酸(Pro) 色氨酸(Trp) 甲硫氨酸(Met) 苯丙氨酸(Phe) 上节课总结 蛋白质的组成与结构（三种分类方法） 氨基酸的种类与结构 纯晶体状态 加 碱 Handerson-Hasselbalch公式 pH = pKa + lg（ [A-]/ [HA] ）= pKa + lg（ [碱]/[酸] ） 可计算出在任一pH条件下一种氨基酸的各种离子的比例。 氨基酸的带电状况与溶液的pH值有关。 表：氨基酸的酸碱化学　 组氨酸的滴定（解离）曲线 p21　 组氨酸 等电点的计算 p22 1.侧链不含解离基团的中性氨基酸 pI = (pK1 + pK2 )/2 2.侧链含有可解离基团的氨基酸 酸性氨基酸：pI = (pK1 + pKR)/2 碱性氨基酸：pI = (pK2 + pKR)/2 半胱氨酸： pI = (pK1 + pKR)/2 2.2.3. 氨基酸的化学反应 1）氨基参加的反应 p48-50 酰基化 烃基化反应 酰基化反应 p48 丹磺酰氯(DNS-CL)与氨基酸反应生成荧光性质强和稳定的磺胺衍生物 烃基化反应 2）羧基参加的反应p23 成酯与成盐反应 酰氯化与酰胺化反应 3）氨基和羧基共同参加的反应p23 形成肽键 填充物： 亲水性的不溶 物质，如 纤维 素、淀粉、硅胶等。 洗脱剂： 与水不互溶的溶剂，如苯酚、正丁醇 等。 层析柱　　 纸层析 纸层析是以滤纸为隋性支持物。滤纸纤维和水有较强的亲和力，在一般条件下较难脱去，而滤纸纤维与有机溶剂的亲和力甚弱，所以一般的纸层析实际上是以滤纸纤维的结合水为固定相，以有机溶剂为流动相 离子交换树脂基质：是具有酸性或碱性基团的人工 合成聚苯乙烯(单体)-苯二乙烯(交联剂)进行聚合和交联反应生成的具有网状结构的不溶性的高分子化合物。 树脂一般都制成：球形的颗粒。 带电基团：是通过化学反应引入基质。 有阳离子和阴离子两种交换树脂。 阳离子交换树脂与阴离子交换树脂 氨基酸与树脂的亲和力：取决于它们之间的静电吸引 和氨基酸侧链与树脂基质之间的疏水相互作用。 离子交换层析　　 本节小结 1.20种氨基酸的结构特征；甘氨酸和脯氨酸结构特点 2.酸性氨基酸与碱性氨基酸；必需氨基酸与非必需基酸；极性氨基酸与非极性氨基酸 3.两性离子；pK值与pI； 4.α－氨基、α－羧基和侧链巯基的化学反应 ；茚三酮反应 5.旋光性；苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的紫外吸收特点 6.纸层析和离子交换层析的原理及方法 书后习题：1, 2，4, 6 CA：一种物质在A相（流动相）中的浓度 CB：一种物质在B相（固定相）中的浓度 分配系数是指一种溶质在两种互不相溶的溶剂中的溶解达到平衡时，该溶质在两种溶剂中所具有浓度之比。不同的物质因其在各种溶剂中的溶解度不同，因而也就有不同的分配系数。 分配层析中应用最广泛的多孔支持物是滤纸，其次是硅胶、硅藻土、纤维素粉、淀粉和微孔聚乙烯粉等。 一般分为：柱层析、纸层析、薄层层析 柱层析分离就是常说的过柱子，也叫柱色谱。 将固定相装于柱内，使样品沿一个方向移动而达到分离。 常用于溶液中蛋白质混合物的分级分离