肝癌干细胞的研究进展综述).doc

肝癌干细胞的研究进展 肝癌是世界第5大常见癌症，以其高致死率成为名副其实的健康杀手。而肝癌发生发展的生物学机制仍未明确【1】。而近年来随着肿瘤干细胞概念的提出，同样在肝癌组织中发现了一群能显著影响肝癌发生、发展，并影响肿瘤复发、转移及耐药性的一类细胞，即肝癌干细胞（LCSCs）。肝癌干细胞（Liver Cancer stem cells，LCSCs）概念的提出，为肝癌的认识及诊治提供了新的思路【2】。本文即肝癌干细胞做一综述。 【关键词】干细胞 肝癌 LCSC 肿瘤干细胞的概念： 在肿瘤组织中，肿瘤细胞表现出较正常细胞不同的多种形态学及功能学上的差异，传统上多认为这种差异是由于肿瘤细胞内正常基因的过表达【3】或异常突变【4】所致。同时细胞生长赖以维持的微环境亦可影响正常细胞的向恶性细胞演变【5】。近年来多向研究表明，肿瘤细胞的多样性及异质性是一类具有类似于正常干细胞的自我修复，多向分化及无限增殖能力的细胞群分化演变的结果，这类细胞群即被称之为肿瘤干细胞（CSCs）。【6-7】肿瘤干细胞是影响肿瘤转移、耐药性及复发的重要因素，因此，基于肿瘤干细胞的诊治将是肿瘤（包括肝癌）诊治的关键。 CSCs最初是从白血病中分离得到的，随后，在多种实体肿瘤组织，包括胃癌、前列腺癌、胰头癌等中先后发现了类似的细胞群。但现阶段关于CSCs的具体来源仍不甚明确，现有的说法认为，其来源：一是干/祖细胞周围细胞微环境的变化和细胞本身基因异常表达所致干细胞的肿瘤化；二是干细胞增殖产生的前体细胞发生突变，丧失成熟能力，仅保留高度增殖能力所致。 而关于肝癌干细胞（LCSCs）的来源亦可分为： 一、慢性肝病（Chronic Liver Disease，CLD）介导下，反复的慢性炎症刺激及肝细胞再生过程中，正常肝干/祖细胞的基因表达及遗传调控的异常而产生。【8】 二、肝细胞所处微环境的改变，正常肝脏细胞的脱分化所致【9】。Barone等人经过实验发现，正常成熟肝脏细胞或胆管上皮细胞在特殊条件下以可发展成为具有无限制恶性增殖分化的细胞群。【10】 LCSCs关系到肝癌起病、进展及治疗的预后。其概念的提出为对肝癌的认识和诊疗提供了新思路。目前，如何有效分离出 LCSCs，并在此基础上实现对肝癌的靶向治疗将是临床上对于肝癌诊疗的重点。现有的常用分选方法有： 1）基于LCSCs细胞表面标志物（cell surface marker）的分选法； 关于LCSCs的细胞表面标志物： 1. EpCAM：EpCAM (Epithelial Cellular Adhesion Molecule)，亦称为CD326、17-A、ESA、EGP4，是一种由GA-733-2基因编码的分子量为40kDa的跨膜糖蛋白EpCAM在结节性肝恶性肿瘤中存在高表达。而沉默EpCAM基因后，肝癌的肿瘤等级、APF水平等显著下降。 2．CD133(cluster of differentiation 133)又名AC133，同样也是一种细胞跨膜糖蛋白，表达于多种干/祖细胞表面，在肝脏肿瘤组织中，CD133（+）细胞相对于CD133（-）的细胞具有更强的增殖能力与致瘤性【13】。Yin【14】等人以1000个CD133（+）细胞注入小鼠皮下导致成瘤。而CD133（-）细胞不具备致瘤性。 3.CD90:又名Thy-1，是一种GPI锚定的细胞表面标记蛋白。在癌前病变肝脏以及增殖胆管细胞中可检测到CD90的表达.Yang【15】等人通过实验发现，CD45(-)CD90(+)细胞群广泛存在于在所有的肝脏恶性肿瘤组织样本和90%以上的肝脏恶性肿瘤血液样本中，并表达有其他如ESA、CD13、CD133等干细胞标志物。在进行的动物移植实验中观察到CD90(+)细胞具有明显的致瘤性。 另外，还有其他多种表面标志物包括：CD13、OV6、K19、c -kit(又称CD117)，ABCG2、ALDH等。 2）侧群（SP）细胞分选法。 目前大量研究表明，肝脏SP细胞内可能富集了多量LCSCs。SP细胞是一类比较特殊的细胞群，能高效外排进入细胞内的DNA荧光燃料（Hoechst33342）。在Zhou等人[16]的研究中发现，肝癌组织中，SP细胞与NSP（non-side populmion cell）细胞相比，具有不同的基因表达谱，而其中某些基因表达明显上调，导致了其具有很高的增殖潜能、肿瘤激发能力及凋亡抑制能力。有学者将从肝癌组织中的SP进行立体培养，结果产生了SP细胞群及非SP细胞群。且通过诱导，SP细胞群可分化成为成熟的干细胞和造血细胞。表明SP细胞具有类似干细胞的多向分化及高度的自我分化能力，可以表现出干细胞特性。【17】 关于LCSCs的耐药性： 现阶段医学对于肝癌治疗仍以手术为主，对于不能切除的肝癌则采取化疗、