4肝铜试验诊断意义概述.pptVIP

杨旭教授简介 杨旭教授，主任医师，博士生导师， 原中南大学湘雅二医院感染科主任、湖南省肝病学专业委员会主任委员、湖南省传染病学专业委员会副主任委员。1981研究生毕业， 1990在美国留学3年。90年代起从事肝病的临床、教学和科研，重点研究肝豆状核变性，亲自诊治肝豆状核变性590余例，患者来自全国各地25个省市（含香港），建立了肝铜测定、基因诊断、快速驱铜等一整套诊疗新方法，诊断准确率99.0%，治疗有效率95%，出版肝豆状核变性专著1部，论文30余篇。 杨教授即将报告的关于肝铜研究的论文已被“Hepatology”接受，已在网上发表，即将在杂志上发表，这是肝铜研究领域具有里程碑意义的论文。 肝铜试验诊断意义的前瞻性研究 中南大学湘雅二医院肝病研究中心 杨旭 唐晓鹏 张永红 罗开忠等 一、研究背景和目的 研究背景 肝豆状核变性（Wilson disease, WD）是重要的遗传性疾病，1912年Wilson首先详细地描述本病 四十年代发现铜的蓄积是本病的原因，1948年Cuming证实肝、脑铜含量升高 1968年Smallwood 在柳叶刀杂志报告在一些肝病中的肝铜含量，证实WD肝铜显著增高，提出诊断WD的标准是≥250μg/g干重 研究背景 但是，以后有多篇论文报告一些典型WD肝铜少于250μg/g干重 2005年Ferenci等发表肝铜研究论文，包括114例WD，219例其他肝病，提出按常规标准，肝铜试验的敏感性83.3%，最佳临界值为≥ 75 μg/g。这一标准后来被美国和欧洲WD指南引用，也被许多论文引用 为什么差别这么大？原因不清楚 存在的问题 2003年我院在国内率先建立的肝铜测定方法，检查了许多病人。根据我们自己的临床观察，我们感到现有肝铜的诊断标准与实际不完全相符。 为此，我们系统地复习了几乎所有的肝铜文献，发现肝铜研究存在几个突出的问题。 存在的问题 1、尽管肝铜试验是WD最重要的的诊断试验，但是其方法没有标准化。 2、以前的研究表明，肝铜的分布是不均匀的。但是，一般用部分肝活检组识测定肝铜，这种方法可能因为取样误差而影响测定结果。 3、所有肝铜研究都是回顾性，没有前瞻性的。 4、所有肝铜研究所包括的病例少，病种少，缺少大样本、多病种研究 研究目的 建立一个简便、可靠的肝铜测定方法（这是研究肝铜试验的诊断意义的前题） 采用前瞻性、多病种、大样本的方法评估我们设计的肝铜测定方法的可靠性 探讨肝铜试验的最佳诊断标准、敏感性、特异性、阳性和阴性预测值 二、研究方法 研究设计 设计概要：前瞻性队列研究 时间：2007年6月—2015年5月 地点：中南大学湘雅二医院肝病中心 纳入标准：可疑WD患者、WD患者的亲属需要肝活检者、其它各种需要进行肝活检者。 排除标准：有肝活检禁忌者、不愿进行肝活检者、WD患者驱铜治疗超过6月、肝组织小于1mg干重 WD诊断标准 根据美国和欧洲WD指南：典型神经症状、铜蓝蛋白降低、K-F阳性、尿铜升高 根据2003年国际WD会议提出的计分诊标准： ≥4，诊断WD 不典型病例、疑难病例根据长期临床观察结果 总之，要确保WD诊断准确无误 肝铜测定方法 B超定位，每人穿刺2针，用1条完整的肝活检组织测定肝铜 将肝组织置于白纸上，迅速用针头将肝组织卷成一小团 将存有肝组织的纸片置于自制的67℃干燥箱2小时，彻底干燥 用万分之一分析天平（METTLER梅特勒E电子天平）准确称取总重（纸+肝），用干净的小刀片将肝组织刮下，置于1.5ml塑料瓶，再称取纸片的重量，即可获得肝组织的重量。 肝铜测定方法 将肝组织送专门实验室，采用浓硝酸+过氯酸（4：1）150 ℃消化，用火焰原子吸收光谱法测定铜含量。 采取三大措施减少测量误差，确保测定结果准确可靠： 肝组织的处理全部由我完成 专业实验室、同一技术人员测定肝铜 每批实验都设有对照肝组织，与待测肝标本平行测定肝铜 统计分析 所用统计分析都是用SPSS软件完成 定量和定性指标分别用T试研和卡方试验进行显著性测定 肝铜试验的诊断意义用敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、ROC表示（受试者工作特征性曲线）。用ROC计算最佳临界值 三、结果 病人入组情况 总肝活检人数：3350 2次肝活检及肝铜测定人数：714 排除例数：23 有效例数：691 总活检例数用于肝活检的安全性分析 总有效例数用于肝铜试验诊断意义分析 各种肝病肝铜含量 疾病种类 例数 肝铜含量（ 250μg/g干重） 肝豆状核变性 178 770.6±393.2 WD杂合子 24 110.7±51.8 PBCPSC 48 318.2±299.7 病毒性肝炎 198