实验4细胞的活力测定(MTS法)讲义.pptVIP

细胞的活力测定 （MTS法） 实验四 细胞活力：在细胞群体中活细胞所占的百分比叫做细胞活力. 为什么要进行细胞活力的测定？ 由组织中分离细胞检查细胞活力以了解分离过程对细胞是否有损伤作用。 复苏后的细胞也要检查细胞活力，了解冻存和复苏的效果。 药物筛选等。 实验目的 1、掌握MTS法测定细胞活力的原理和方法。 2、了解细胞活力测定的相关应用。 3、熟悉酶标仪的使用。 4、掌握血细胞计数板的计数方法和原理。 实验原理 染色排除法（最常用） 台盼蓝法：死细胞染成蓝色，活细胞不着色 苯胺黑法：死细胞染成黑色，活细胞不着色 荧光排除法： MTT法：琥珀酸脱氢酶可将MTT还原为蓝紫色结晶颗粒，后者产量与活细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比，反应完成后测定560nm时的吸光度。 MTS法的原理与MTT法相同（测定490nm吸光度值），灵敏度高，操作简单。。 生活力强的细胞能发出强烈的黄绿色荧光；死亡细胞无荧光。 细胞内酶与特定试剂的显色反应： 细胞活力鉴定的方法： 酶标仪 实验内容 1.测定抗癌药物对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系的IC50. 2.细胞倍比稀释测定细胞活力. IC50（ ?inhibitory?concentration?50% ）：药物抑制细胞活力50%时的浓度。 单位：nM,uM 3.细胞计数. 实验目