2012高生物总复习 第46讲 基因工程教案.docVIP

【知识梳理】 基因工程 概念 2.诞生历程 3.基本工具 4.操作程序应用 【重点解析】 考点一 基因工程的工具及其操作程序 1．基因工程的基本工具 2．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取 ①从基因文库中获取目的基因 优点：有了基因文库，就可以随时从中提取所需要的目的基因，引入受体细胞使之表达。 ②人工合成目的基因 ③利用PCR技术扩增目的基因 a．PCR：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基因的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。 b．目的：通过指数式扩增获取大量的目的基因。 (2)基因表达载体的构建 ①目的’：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，并使目的基因能够表达和发挥作用。 ②基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。 a．启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端。它是RNA聚合酶识别、结合的部位。 b．终止子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端。作用是使转录过程停止。 C．标记基因：一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导人成功)。 ③基因表达载体的构建方法 (3)将目的基因导入受体细胞 ①目的：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 ②受体细胞种类不同，导入方法不同 ③受体生物不同，所用的受体细胞种类也不相同 a．植物：可以是卵细胞(受精卵)、体细胞(可经组织培养成为完整植株)。 b．动物：受精卵(因为体细胞的全能性受到严格限制)。 ④转化实质：目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。 (4)目的基因的检测与鉴定 考点二、基因工程的应用 1．基因工程的应用 (1)植物基因工程成果 ①抗虫转基因植物(抗虫棉是转入Bt毒蛋白基因培育的)。 ②抗病转基因植物(病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因)。 ③抗逆转基因植物(生物的抗性基因)。 ④转基因改良植物(营养价值、实用价值、观赏价值)。 (2)动物基因工程成果 ①提高动物生长速度(外源生长激素基因)。 ②改善畜产品的品质。 ③转基因动物生产药物(牛、山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、a一抗胰蛋白酶)。 ④转基因动物作器官移植的供体(导入调节因子抑制抗原决定基因表达或除去抗原决定基因，培育没有免疫排斥反应的转基因克隆器官)。 (3)基因工程药物 ①来源：主要来自转基因工程菌。 ②成果：细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 ③作用：预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、糖尿病、类风湿等疾病。 (4)基因治疗 ①概念：是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，是目前治疗遗传病最有效的手段。 ②成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者淋巴细胞中，治疗复合型免疫缺陷症。 ③方法 a．体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞，如T淋巴细胞，进行培养。然后，在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。 b．体内基因治疗：直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法。如1994年美国科学家利用经过修饰的腺病毒作载体，成功地将治疗遗传性囊性纤维化病的正常基因转入患者肺组织中。 【名师点拨】 DNA聚合酶和DNA连接酶的比较 比较项目 DNA聚合酶 DNA连接酶 形成磷酸二酯键的方式 只能将单个脱氧核苷酸连接起来，形成磷酸二酯键 是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键 不 同 点 是否需要模板 以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链 是将DNA双链上的两个缺VI同时连接起来，因此DNA连接酶不需要模板 是否参与基因工程 没有参与 在基因工程中，DNA连接酶可以作为连接运载体和目的基因的“针线” ①两者化学本质都是蛋白质。 ②两者均属于酶，具有酶的基本属性和特点。 相 同 点 ③两者都能形成磷酸二酯键，即在相邻核苷酸的3位碳原子的羟基与5位碳原子上所连接的磷酸基团的羟基之间形成。 ④两者均参与DNA的复制、逆转录等过程。 一、导入新课 ??? 众所周知，对于大多数生物而言， DNA是主要的遗传物质，有遗传效应的DNA片段叫基因，生物之所以