1实验六细胞核和线粒体的荧光观察答题.ppt

实验六 细胞核和线粒体的荧光观察 一、实验目的 学习荧光显微镜的工作原理及使用方法 了解荧光探针Rhodamine 123 和Hoechst33342 与细胞成分的结合特性和光谱特性 二、实验原理 1.荧光显微镜 细胞参量 荧光探针 吸收/发射 nm 特性 DNA和RNA Propidum iodide(PI) 535/617 红色荧光 嵌入核酸双链间,只能标记死细胞.用于 染色体,细胞观察,分辨死活细胞和细胞周期研究 Ethidium bromide(EB)518/605 红色荧光 嵌入核酸双链间,只能标记死细胞.用于电泳分析,染色体观察 DAPI 358/461 蓝色荧光 半通透细胞,结合于DNA的AT碱基对.用于细胞周期的研究,染色体和细胞核的观察 Hoechst33342 350/461 蓝色荧光 结合于DNA的AT碱基对,可进入活细胞,用于细胞周期的研究,染色体和细胞核的观察 蛋白和抗体的耦联探针 FITC 494/518 绿色荧光 染死细胞,对PH值变化不敏感 Texas red 595/615 红色荧光 多参量细胞标记 溶酶体 Neutral red 541/640 红色荧光 探针微偏碱性,可标记溶酶体等酸性细胞器 线粒体 Rhodamine 123 507/529 黄绿色荧光 可进入活细胞,阳离子性,摄入快,淬灭快,无毒性 常用荧光