一种快速有效的细菌鉴定方法资料.ppt

一种快速有效的细菌鉴定方法 传统的细菌鉴定方法是根据微生物的细胞形态、生理生化特征、血清学反应、噬菌体敏感性等多方面进行综合鉴定的，使用该方法进行鉴定的依据为细胞的表形特征，其缺点是检测项目多、工作量大、耗时、结果不稳定等，易出现弱反应或假阳性。 现代的方法：利用了PCR的方法，根据16s rDNA两端的保守序列，设计引物PCR扩增未知细菌的16s rRNA基因，然后对PCR扩增的DNA片段进行序列分析，经与GenBank中的已知序列进行同源性比较后，对未知菌种进行鉴定。该方法是在分子水平上对细菌进行的分类，具有快速、准确、重复性好等优点。 鉴定的原理 细菌的rRNA是细胞内含量最多的RNA，约占总量的80%以上，其分子量大，种类多，由高度保守区和可变区组成。细菌的rRNA包括5S、16S、23S，其中5S rRNA信息量少，不适合分析；23S rRNA分子大，信息量多，但碱基突变速度较快，同样不适于细菌鉴定；相比之下16S rRNA的遗传较为稳定，长度在1550±200bp左右,代表信息量适中，是研究系统进化的好材料。目前已报道了10000种以上的细菌16S rDNA序列，通过对16S rDNA序列分析，可以将细菌划分到属或种，对于难以培养的细菌、生化反应不明显及传统表型方法不能鉴定的细菌，使用该法鉴定细菌尤为方便。 本文以某食品公司的食品原料和加工后成品中的细菌检测为例，简述细