《血红蛋白的提取和分离》精选.ppt

蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化合物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。怎样提取蛋白质呢？ 凝胶色谱法是根据被分离物质的蛋白质___________的大 小，利用具有_______的凝胶的________作用，来进行分离。 1．凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。 A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度 4. 凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是（ ） A. 糖类化合物 B. 脂质 C. 蛋白质 D. 核酸 作用机制：以H2CO3 / NaHCO3 为例 A：当酸性物质（如乳酸）进入后，与溶液中的 NaHCO3 发生作用，生成乳酸钠和碳酸，而碳酸可以分解成CO2和H2O，CO2排出则PH不变； B：当碱性物质（如碳酸钠）进入后，与溶液中的H2CO3 发生作用，形成 NaHCO3 ，溶液PH不变。 缓冲溶液是指在一定的范围内，凡是能够抵制__________________的影响使原来溶液______________不变的混合溶液。 2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度 分离过程： 1．SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是 A．增大蛋白质的相对分子质量 B．改变蛋白质的形状 C．掩盖不同种蛋白质问的电荷差别 D．减少蛋白质的相对分子质量 2．使用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的迁移速度完全取决于 A．电荷的多少 B．分子的大小 C．肽链的多少 D．分子形状的差异 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决 于它所带___________以及_________等因素。 SDS能使蛋白质发生_________。由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会___________ ，因此测定的结果只是_______________。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量________了蛋白质分子原有电荷量。因而掩盖了不同种蛋白质间的________，使电泳迁移率完全取决于___________。 教学反馈 1．凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。 A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度 2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度 3．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向 练习巩固 C B 净电荷的多少 分子的大小 （SDS）含义是 十二烷基硫酸钠 基础巩固 聚丙烯酰胺凝胶是由_______________和________________________在______和_______的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。 单体丙烯酰胺 交联剂N,N’-亚甲基双丙烯酰胺 引发剂 催化剂 完全变性 解聚成单条肽链 单条肽链的分子量 大大超过 电荷差别 分子的大小 基础巩固 B B B * 蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。 血液 血浆 水 分 固体物质： 血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等 血细 胞 白细胞 血小板 红细胞 （最多） 血红蛋白 （90％） 两个α－肽链 两个β一肽链 四个亚铁红素基团 2.提问：血液有哪些成分？ 1.提问：用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？ 鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取；人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。 1.分离生物大分子的基本思路： 选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2.蛋白质分离和提取的原理： 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种