B_02 水体中大肠菌群的测定.pptVIP

【目的要求】 1. 学习和掌握大肠菌群的测定方法（多管发酵法） 2. 了解测定过程中每一步的反应原理。 3. 了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性 发酵法： 又称多管发酵法或三步发酵法(此法是根据大肠菌群具有发酵乳糖产酸产气的特性，利用含乳糖的培养基培养不同稀释度的样品经初发酵、平板分离和复发酵3个检测步骤，最后根据结果查最大自然数（most probable number）表，算出食品中的大肠菌群数。 ) 发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基，并倒置杜氏小套管。乳糖能起选择作用，因为很多细菌不能发酵乳糖，而大肠菌群能发酵乳糖而产酸产气。为便于观察细菌的产酸情况，培养基内加有溴甲酚紫作为pH指示剂，细菌产酸后，培养基即由原来的紫色变为黄色。溴甲酚紫还有抑制其他细菌如芽孢菌生长的作用。 水样接种于发酵管内，37℃下培养： （1）24h内小套管中有气体形成，并且培养基混浊，颜色改变，说明水中存在大肠杆菌，疑为阳性结果； （2）在量少的情况下，也可能延迟48h后才产酸产气，此时应视为可疑结果。 以上两种结果均需继续做下面两部分实验，才能确定是否是大肠菌群。 （3）48h后仍不产气的为阴性结果。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University Central La