抗狂犬病血生产简介.pptVIP

* * 抗狂犬病血清 生产简介 2006年5月 抗狂犬病血清 系由狂犬病固定毒免疫马的血浆，经精制、胃酶消化、纯化制得的液体或冻干免疫球蛋白制剂。 用于狂犬病的预防。 一、免疫血浆 为获抗毒效价高的免疫血浆 ，马匹、免疫原及免疫方法是重要的条件。 （一）马匹的选择 制造抗毒素所用马匹应健壮(过幼者免疫器官发育不健全，过老者免疫机能衰退，最好是4∽8岁)。 无传染病(包括马传染性贫血、马鼻疽、布氏杆菌病、马副伤寒性流产及其他传染病)和恶性肿瘤等。 由液体石蜡与羊毛脂配成“油包水” 的不完全福氏佐剂是马匹免疫最常用、效能最好的佐剂。 （二）免疫原长期反复地给马进行免疫，在马体内将产生高效价的抗血清。 (三)免疫方法 基础免疫：从马体初次接受免疫原刺激，到产生少量特异性抗体的阶段即第一次免疫应答阶段。 超免疫：基础免疫以后的强化免疫。 有了第一次免疫应答后，再次接触同一免疫原就会迅速出现第二次免疫应答。抗血清效价将会急剧上升。 对超免成功的马匹予以采血并开始再次免疫注射，如此反复的每一循环通称“1程”、“2程”……超免疫。 (四)采血及血浆的分离 免疫血清效价不低于100IU/ml时即可采血。 ( 2005年版《药典》三部 ) 采血有 “部分采血”与“全采血”两种方式。前者指每程超免疫后由颈静脉采血l—3次，每次5000m1左右；后者指由颈动脉采血直至马匹死亡。 二、抗血清的精制 抗血清制造方法的改进与制品质量的提高大体经历了三个历史阶段。 最初的阶段是“原制血清”．即不做加工处理，仅加防腐剂、除菌过滤。 其次是应用适宜的理化方法(主要是硫酸铵盐析法)去除血浆中的大部分非特异性蛋白(包括白蛋白、纤维蛋白等)，并使抗体蛋白得到一定的浓缩，单位体积所含抗毒素单位数量显著提高，称为“浓制血清”。 蛋白酶精制法的研究和创建，使得抗血清制造方法跨入了一个新的历史阶段。 ①纯净度：含杂蛋白的程度。 ②提纯系数：通称R值，即精制品每g蛋白 所含单位数与原血浆每g蛋白所含单位数的比值。 ③收获率：精制品总单位数与原血浆总单位数的比值(%)。  前两指标经常与后者互相矛盾，在工艺上予以适度调节而兼顾。 衡量精制效果优劣的主要指标 质量的要求及检定 抗毒素除做预防用外还常被用于治疗，而且治疗剂量往往很大。 制造工艺比较复杂，生产周期较长，容易被污染。 1．安全性 主要指制品污染的杂质引起的副作用。例如细菌、热原质、类A血型物质以及其它毒性物质等， 2005年版《药典》三部中都有具体的检定方法并规定有最低要求标准(参阅2005年版《药典》三部)。 2．纯度及比活性 由于马匹免疫方法及抗血清精制方法的改进，抗血清的纯度(免疫球蛋白的纯一性)与比活性(每g蛋白所含单位数)均有显著的提高，这些是代表精制抗毒素质量的主要指标，2005年版《药典》三部中均有检查方法及要求标准的规定。 精制工艺改进 抗血清制造工艺的改进很大的提高了临床应用于治病防病的免疫血清制品的质量。 蛋白酶精制法 马血清抗体的分子结构与人的IgG基本相同，分子量184KD，大小4×27.7nm。 马血清抗体在马匹免疫初期阶段从属于免疫血清的γ球蛋白。 随着免疫程度的逐步加深，抗血清的分布逐渐向β球蛋白转移，从属于γ与β两球蛋白之间新出现的免疫球蛋白，被称为T球蛋白或β2球蛋白(此时原β球蛋白称作β1球蛋白)。 抗毒免疫马血清经硫酸铵盐析。30％一50％饱和沉淀物几乎全是β2 (T)球蛋白部分。此部分经胃酶处理后，又在β2与γ之间出现一个新峰。进一步用硫酸铵盐析浓缩，此新峰乃被提纯成精制抗血清。