DNA重组技术重点解析.pptVIP

DNA重组技术 DNA重组技术： 按照人的意愿在体外对 DNA 分子进行重组， 再将重组分子导入受体细胞，使其在细胞 中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 （二）目的DNA片段与载体的连接 DNA连接酶 酶促生化反应 粘性末端的DNA分子最容易相互连接，连接效率也是最高的。 连接反应的最适合温度是12~16度 克隆载体具备的特征： 1 载体必须具有自我复制和表达的能力 2 载体不能过大 3 载体与宿主细胞容易分离和纯化 4 具有两个以上的遗传选择标记，便于区别阳性和阴性克隆 特征 功能 在宿主细胞内稳定 允许复制 能控制自身复制 在细胞内复制高拷贝数 大小较小 容易转化，进入宿主细胞 存在限制性内切酶单一 允许供体DNA插入和质粒环化 酶切位点 不能通过接合转移 阻止重组DNA进入菌群 易于检测的特性，具有 可以区分转化和未转化细胞 两个以上的检测位点 容易从细胞中分离 容易得到高产量重组体 （一）DNA重组的方法1、分类：