第七章 化学致癌作用及其评价幻灯片.ppt

二、促长阶段 恶性肿瘤的发生是一个逐渐演变的过程，人体上某些器官的一些良性病容易出现细胞异常增生，具有恶性变化倾向，这些异常增生具有癌变倾向的病变称为癌前病变。 属于癌前病变的疾病 乳腺病 直肠的家族性乳头状腺瘤 慢性胃溃疡 肝硬化 皮肤的黑痣等 慢性胃溃疡恶变 肝硬化 二、促长阶段 良性肿瘤是指机体内某些组织的细胞发生异常增殖，呈膨胀性生长，似吹气球样逐渐膨大，生长比较缓慢。由于瘤体不断增大，可挤压周围组织，但并不侵入邻近的正常组织内，瘤体多呈球形、结节状。周围常形成包膜，因此与正常组织分界明显，用手触摸，推之可移动，手术时容易切除干净，摘除不转移，很少有复发。 二、促长阶段 促长阶段的特点： 促长阶段历时较长，早期有可逆性，晚期为不可逆的，因此在促长阶段（特别是在早期）持续给以促长剂是必需的。 2.促长阶段的另一个特点是对生理因素调节的敏感性，衰老、饮食和激素可影响促长作用，许多影响因素本身就是促长剂。 二、促长阶段 促长剂的可能作用机制： 干扰细胞信号转导途径 改变细胞周期控制 促进引发细胞的增殖 抑制细胞凋亡 抑制细胞间通讯 免疫抑制等 三、演进阶段 演进阶段指从癌前病变或良性肿瘤转变成恶性肿瘤的过程。如生长加快、侵袭、转移、抗药性等。 进展剂（progressor ）：指使细胞由促长阶段进入进展阶段的化学物。进展剂具有引起染色体畸变的特性。 完全致癌物（complete carcinogen）：指同时具有引发、促长及进展作用的化学物。 三、演进阶段 进展阶段关键的分子特性： 染色体的不稳定性 主要表现：染色体发生断裂 染色体断片易位 非整倍体等 前致癌物 终致癌物 分化的肿瘤 引发的细胞 细胞含错配碱基 细胞死亡 不分化的癌 致癌物-DNA加合物 正常细胞 活化 转移 DNA结合 DNA修复 DNA修复失败 促长 进展 癌变多阶段学说 第四节 化学致癌作用的评价方法 一、短期试验 （一）致突变试验 （二）哺乳动物细胞恶性转化试验 （三）哺乳动物短期致癌试验 （四）转基因动物致癌检测模型 一、短期试验 （一）致突变试验 用于致癌物筛选的致突变试验如下： 1.基因突变试验：鼠伤寒沙门菌回复突变试验（Ames试验）、培养哺乳动物细胞胸苷激酶位点（tk）或次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸核糖基酶位点（hgprt）正向突变试验 2.染色体畸变试验：体外细胞系细胞遗传学试验、小鼠骨髓微核试验、大鼠骨髓染色体畸变试验 3.原发性DNA损伤：DNA加合物、链断裂、彗星试验、DNA修复诱导（细菌SOS反应，大鼠肝UDS诱导）、姐妹染色单体交换试验 一、短期试验 （一）致突变试验 预测致癌性的理想的致突变试验应能灵敏地预测出受试物的致癌性，也能特异地预测出受试物的非致癌性，即要有高的灵敏性、特异性。 一、短期试验 （二）哺乳动物细胞恶性转化试验 本试验以细胞恶性转化为观察终点，在细胞生物学水平上研究肿瘤的发生与发展。 细胞转化指培养细胞在有害因素作用下发生一系列与肿瘤形成有关的细胞形态学及生物学特性的改变。 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 细胞恶性转化的判定： 1.形态学变化 2.凋亡敏感性降低 3.锚着独立性生长 4.血清抗性试验 5.刀豆蛋白A凝集试验 6.动物体内成瘤性 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 1.形态学变化 正常细胞呈单层生长，排列有序。而转化细胞呈多层生长，极性消失，其中，恶性转化的上皮细胞群中会出现纺锤形的成纤维样细胞；而成纤维细胞则呈纺锤形或上皮细胞样改变，并形成转化灶。 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 2.凋亡敏感性降低 凋亡敏感性降低在人细胞转化中起重要作用。 常用细胞凋亡的检测方法： 常规的琼脂糖凝胶电泳 流式细胞仪检测细胞凋亡（Annexin V/PI双染法） 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL法） 一、短期试验 （二）细胞恶性转化试验 3.锚着独立性生长 转化细胞对血清及细胞间通讯的依赖性降低，具有在低密度条件下在半固体琼脂中形成集落的能力，即锚着独立性生长，它是癌前转化的特征，是体外检测细胞恶性转化的重要指标。但并不能反映其裸鼠成瘤性。 一、短期试验 （二）细